Estudio del movimiento sistémico del virus de la psorosis de los cítricos desde un pie de naranjo dulce transgénico resistente a una copa no resistente

DE FRANCESCO A.1, REYES CA.1, ROBLES LUNA G.1, OCOLOTOBICHE EE. 1, BORNIEGO MB 1., COSTA N.2 Y ML GARCIA

Congreso; CONGRESO ARGENTINO DE VIROLOGIA; 2011

Introducción: Citrus psorosis virus (CPsV) es el agente causal de la enfermedad psorosis de los cítricos, miembro tipo de la familia Ophioviridae. Posee un genoma tripartito a RNA de simple hebra, polaridad negativa y morfología circular. Su genoma codifica para la polimerasa viral, la proteína de cubierta (CP) y dos proteínas denominadas 24K y 54K, cuyas funciones se encuentran en estudio. Se han obtenido líneas transgénicas de naranjo dulce pineapple (NDP) que expresan RNAs transcriptos tipo hairpin del gen cp (ihpCP), capaces de inducir el mecanismo de silenciamiento génico post transcripcional (PTGS) para el RNA 3 de CPsV que contiene este gen, impidiendo el avance de la infección. Objetivo: Evaluar la capacidad de movimiento de CPsV desde el tejido transgénico hacia el tejido susceptible presente en pie y copa del híbrido. Metodología: Se generaron híbridos obtenidos por injerto de yemas de diferentes especies de cítricos. Se partió de un “pie” de limón rugoso (LR), al que se le injertó un NDP ihpCP (líneas 10 y 15) denominado “puente”. Luego de su crecimiento se le injertó una yema de NDP, denominada “copa”, transgénica portando el gen cp (línea 18) o no transgénica (control). La inoculación con CPsV fue realizada en el puente, el cual resultó resistente. La evaluación de la infección de cada parte del híbrido se realizó por observación de síntomas (clorosis y necrosis foliar), TAS-ELISA y RT-PCR. Resultados: De ocho individuos híbridos cuyo puente pertenece a la línea ihpCP-10 todos los pies LR fueron positivos para CPsV. De estos ocho, cuatro fueron injertados con copas no transgénicas que resultaron positivas, mientras que los otros cuatro, injertados con la línea 18, no se infectaron. En el caso del puente ihpCP-15, los cinco híbridos pie LR/puente ihpCP-15/copa no transgénica, fueron negativos para CPsV en todo el híbrido, es decir, incluyendo en sus dos partes potencialmente susceptibles. De los cuatro híbridos pie LR/puente ihpCP-15/copa línea 18, dos resultaron negativos y dos positivos tanto en el pie como en la copa. Conclusiones: las plantas ihpCP resistentes aunque no manifiesten síntomas ni se detecte en ellas el virus por métodos moleculares (ELISA y RT-PCR), son capaces de transmitirlo a otras partes de la planta que fueran susceptibles. El virus podría replicarse en aquellas zonas en las cuales el mecanismo de silenciamiento génico no ha sido establecido eficientemente con anterioridad a la llegada del virus.