Análisis de la región pX proviral del virus de la leucemia bovina en las diferentes presentaciones clínicas de la leucosis enzoótica bovina

PANEI CJ; ECHEVERRÍA MARÍA; SERENA M; METZ G. E.; CORVA SG; GONZÁLEZ ET

Villa Giardino, Córdoba

Jornada; XXX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Virología; 2010

Sociedad Argentina de Virología

La Leucosis Enzoótica Bovina (LEB) es una enfermedad crónica causada por el virus de leucemia bovina (VLB). El VLB pertenece a la familia Retroviridae (género Oncovirus) y está ampliamente distribuido en poblaciones bovinas de muchos países incluyendo la República Argentina. El genoma del VLB está formado por dos moléculas idénticas de RNA unidas por enlaces no covalentes (dímero) que se transcriben a DNA de doble cadena, por acción de la enzima transcriptasa reversa y posteriormente se integra al genoma de los linfocitos “B” (provirus). Aproximadamente un 30% de los bovinos infectados desarrollan linfocitosis persistente (LP) y 0,1 a 5% pueden desarrollar tumores que llevan invariablemente a la muerte. Un 65-70% de los bovinos permanecen como portadores asintomáticos, seropositivos y aleucémicos (AL).El provirus posee genes reguladores (transcripcionales y postranscripcionales) y estructurales (gag, pol y env). Los genes reguladores están localizados en dos regiones: una región denominada pXVLB que comprenden los genes Tax, Rex, R3 y G4 y otra región en los extremos 5’ y 3’ conocida como regiones LTR. Según estudios previos, los genes pXVLB intervendrían en los procesos de tumorogénesis actuando en la regulación transcripcional y postrancripcional. Esta región contiene marcos abiertos de lectura (ORFs) principales (Tax y Rex) y alternativos (R3 y G4). La variabilidad presente en esta región podría determinar la evolución clínica de la enfermedad. Para ello nuestro objetivo fue compararla la región pXVLB proviral en diferentes estadios de la enfermedad.El estudio se llevó a cabo en 12 bovinos de raza holstein que fueron categorizados mediante el análisis clínico (presencia de tumor) y de laboratorio (serológico, PCR y formula sanguínea) en tres grupos: Grupo I: 4 bovinos holstein VLB+ con tumor, Grupo II: 4 bovinos holstein VLB+ con LP y Grupo III: 4 bovinos holstein VLB+ con AL.El análisis de la región pXVLB se llevo a cabo por secuenciación genómica y traducción a sus respectivos aminoácidos. Para ello previamente con el programa DNAman (Lynnon BioSoft 1994-1999) se diseñaron tres pares de primers, dividiendo la región pXVLB en tres, denominadas: pXVLB1 (Forward: 6910-6929, Reverse 7424-7518), pXVLB2 (Forward: 7405-7424, Reverse 8053-8074) y pXVLB3 (Forward: 7862-7881, Reverse: 8292-8302). Fue analizada la secuencia aminoacidica a partir de la secuencia publicada en el Genbank K21020 utilizada como cepa de referencia. Los resultados obtenidos comparando las secuencias aminoacídicas de cada uno de los genes de la región pXVLB en los 12 bovinos holstein y con la cepa de referencia fue: para el gen TAX un porcentaje de similitud de 97,4-100%, para el gen REX de 95,9-100%, para el gen R3 de 92,3-100% y por último para el gen G4 el porcentaje de similitud fue de 93,8-100%. Estos resultados demuestran la escasa variabilidad encontrada en la región pXVLB en los provirus de los 12 bovinos para los tres estadios de la enfermedad. De este modo los estadios de la LEB (Tumor, LP y AL) no estarían relacionados a esta región regulatoria del provirus.