Caracterización genotípica de Escherichia coli enterotoxigénica aisladas de cerdos con diarrea posdestete

MOREDO F.; CAPUCCIO J.; INSARRALDE L.; PERFUMO C.; QUIROGA A.; PELLEGRINO F.; CAPALBO S.; LEOTTA G.A.

Mercedes, Corrientes

Jornada; XVIII Reunión Científico Técnica Asociación Argentina de Veterinarios de Laboratorios de Diagnóstico; 2010

Asociación Argentina de Veterinarios de Laboratorios de Diagnóstico

Introducción Escherichia coli enterotoxigénica (ETEC)  y E. coli productora de toxina Shiga (STEC), son las causas más frecuentes de la diarrea posdestete y enfermedad de los edemas de los cerdos. ETEC es un patotipo caracterizado por la producción de adhesinas fimbriales y no fimbriales que median la unión al enterocito y toxinas que ocasionan la diarrea. Éstas últimas se clasifican en termolábil (LT) y termoestables (STa, STb y EAST1). En los últimos años, se describió la aparición de un nuevo subgrupo de ETEC porcinas, negativas a factores de colonización fimbriales pero que expresan una adhesina no fimbrial envuelta en la adherencia difusa (AIDA). El objetivo del presente trabajo fue caracterizar genotípicamente  las cepas ETEC aisladas a partir de cerdos con diarrea posdestete demostrando la presencia de genes codificadores de toxinas y factores de colonización. Materiales y Métodos Para la realización de este trabajo se procesaron 44 aislamientos clínicos toxigénicos provenientes de cerdos posdestete de seis granjas localizadas en las provincias de Buenos Aires, Santa Fé y Córdoba. Las ETEC fueron obtenidas de hisopados rectales de animales con diarrea. El aislamiento y caracterización fenotípica de E. coli se realizó utilizando las técnicas convencionales. La caracterización genotípica de ETEC se realizó por PCR en tiempo final descriptas por Chapman y col. y Ngeleka y col. Se buscaron 13 genes que codifican los siguientes factores de virulencia: toxinas LT, STa, STb, EAST1, STX2e; factores de adhesión fimbriales F4, F5, F6, F18, F41 y no fimbriales intimina (eae), proteína asociada A/E (Paa) y adhesina involucrada a adherencia difusa (AIDA-I).   Resultados Entre las 44 cepas de E. coli procesadas, se detectaron 10 patotipos diferentes. El 43,2 % (19/44) de los aislamientos fue positivo para los genes STa/STb/F18, seguido por la combinación STa/STb en el 15,9 % (7/44) de las muestras. El patotipo más complejo fue LT/STb/EAST1/F4/AIDA (una cepa), seguido por LT/STb/EAST1/F4 (una cepa), STa/STb/F18/AIDA (dos cepas), LT/STa/STb/EAST1 (una cepa), LT/STb/EAST1 (una cepa), EAST1/AIDA (siete cepas).  Sólo en cinco cepas (11,4 %) se detectó el gen east1 como único marcador de virulencia. En la Tabla 1 se expresan los porcentajes de ETEC en las cuales se detectaron los genes que codifican los diferentes factores de patogenicidad: toxinas y factores de colonización fimbriales F4 y F18 y no fimbriales AIDA-I. No se detectaron  los genes que codifican las fimbrias F5, F6, F41 ni las proteínas intimina o Paa en ninguna de las cepas estudiadas. Tabla 1. Porcentaje de cepas en las cuales se detectaron los genes que codifican los diferentes factores de patogenicidad. Toxinas Factores de colonización Fimbriales No fimbriales Stx2e LT STa STb EAST F4 F18 AIDA-I 4,5 9 61,4 68,1 36,4 4,5 43,2 22,7  Discusión En coincidencia con los resultados obtenidos por Matiuzzi y col. en el sur de Brasil, el mayor porcentaje de cepas presentaron el gen que codifica la toxina STb (68,1 %), seguido de STa (61,4 %). El gen de adhesina con mayor porcentaje de detección fue F18 (43,2 %) siendo este resultado el esperado ya que las cepas caracterizadas fueron obtenidas de animales con diarrea pos-destete. Si bien está en discrepancia el valor de detección del gen east1 cuando se presenta sólo, en el presente estudio en el 68,7 % (11/16) de las cepas, se lo observó asociado a los genes para STb o AIDA-I por lo que podrían considerarse como importantes marcadores de virulencia de E.coli asociadas a diarreas en cerdos. Los datos obtenidos dan una idea de los patotipos de E.coli diarreagénicos, presentes en nuestro país, siendo este el primer relevamiento de factores de colonización fimbriales y no fimbriales de cepas autóctonas, el cuál contribuye con información para la implementación  de medidas de prevención.