Detección, caracterización genotípica y sensibilidad antimicrobiana de E. coli enterotoxigénico y productor de toxina Shiga aislados de cerdos con infección sublclínica

MOREDO F.; PINEYRO P.; CAPUCCIO J.; PELLEGRINI F.; QUIROGA A.; PERFUMO J.; LEOTTA G.A.

Mendoza

Congreso; X Congreso de la Asociación Latinoamericana de Veterinarios especialistas en Cerdos (ALVEC), X Congreso Nacional de Producción Porcina y XVI Jornadas de Actualización Porcina.; 2010

Universidad Nacional de Río Cuarto

Introducción                 Las principales bacterias que producen infecciones entéricas en los cerdos son Escherichia coli enterotoxigénico (ETEC) y E. coli productor de toxina Shiga (STEC). ETEC puede ocasionar diarreas severas en recién nacidos y lechones lactantes a través de la producción de las toxinas termoestable (ST) y termo lábil (LT). Objetivo Determinar la prevalencia STEC y ETEC en cerdos clínicamente sanos en 11 granjas de la Provincia de Buenos Aires. Metodología En el año 2007, se muestrearon cerdos clínicamente sanos de 11 granjas de producción porcina de la Provincia de Buenos Aires. La población animal se dividió en tres estratos en función a la edad y etapa de producción: M3 (lechones, 21 días), M6 (crecimiento, 86 días), M8 (terminación, 165 días). En total, se procesaron 990 hisopados rectales (90 de cada granja; 30 de cada uno de los estratos), los cuales fueron sembrados en agar MacConkey, incubándose las placas a 42°C durante 24 h. La prevalencia de STEc se determinó mediante la detección del gen stx2e, y la prevalencia de ETEC mediante la detección de los genes estI y eltA. La detección de estos genes se realizó por PCR en tiempo final (citas?). Se utilizó como ADN templado la primer estría de desarrollo bacteriano. Una vez identificado el animal positivo, se buscaron las colonias portadoras de los genes detectados, para su posterior caracterización y la determinación de la susceptibilidad frente a 18 antimicrobianos por el método de difusión (agregar cita de CLSI?). Se definieron como multirresistentes aquellos aislamientos que presentaron resistencia a tres o más grupos de antimicrobianos. Resultados De las 990 muestras procesadas, hubo desarrollo bacteriano en 986. Los genes stx2e y estI / eltA Sfueron detectados en el 11,6% y 15% de las muestras respectivamente. En el estrato M3, no se detectaron animales portadores del gen  stx2e en ninguna granja. Sin  embargo, en los estratos M6 y M8, el 63,6% (7/11) y el 54,4% (6/11) de las granjas fueron positivas para este gen. En todas las granjas estudiadas se detectaron alguno de los genes característicos de ETEC (estI y eltA) el 72,7% (8/11), 90,9% (10/11) y 54,5% (6/11) en los estratos M3, M6 y M8 respectivamente. En el 72,7% (8/11) de las granjas se detectaron animales portadores de la combinación de genes estI y/o eltA/stx2e; el 45,4 % (5/11) y 27,3% (3/11) en los estratos M6 y M8 respectivamente. Hasta el momento, se aislaron 19 cepas de ETEC (2 portadoras de genes estI/eltA, 2 del gen eltA y 15 del estI); 11 STEC (portadoras del gen stx2e) y 7 que presentaron la combinación stx2e/estI. Con respecto a la sensibilidad antimicrobiana, el 100% de las cepas fueron sensibles a cefalotina, amoxicilina/ácido clavulánico, cefotaxima, cefoxitina, gentamicina, amicacina, colistina, nitrofurantoína y fosfomicina. Sólo dos cepas portadoras del gen estI aisladas a partir de dos animales de 21 días pertenecientes a una misma granja, fueron sensibles a los 18 antimicrobianos probados. El 89,2% de las cepas fue sensible a ciprofloxacina. El 51,3% de las cepas fue sensible al ácido nalidíxico y el 21,6% de las cepas presentó sensibilidad intermedia a este antimicrobiano. El 59,4% de los aislamientos fue sensible a cloranfenicol y florfenicol. El 51,3% fue sensible a trimetoprima sulfametoxazol y el 10,8% mostró sensibilidad intermedia a la misma droga. El 29,7% de las cepas fue sensible a estreptomicina. Con respecto a la tetraciclina sólo el 5,4% de las cepas fueron sensibles, a diferencia de la doxiciclina para la cuál se observó 8,1% de sensibilidad y 21,6% de sensibilidad intermedia. De las 37 cepas estudiadas, 25 (67,6%) fueron multirresistentes. Siete fueron resistentes a 5 grupos de antimicrobianos, 13 cepas a 4 grupos y 5 a 3 grupos. Los patrones de resistencia más frecuentes fueron: AMP, S, TET/DOX, TMS, CMP/FLOR (5/7); AMP, S, TET/DOX, FLOR/CMP (3/13), S, TET, TMS, CMP/FLOR (3/13); S, TET, FLOR/CMP (3/5). Discusión Este es el primer relevamiento de ETEC y STEC realizado a partir de cerdos clínicamente sanos en Argentina. En 2004, Parma y col. (año?) estudiaron 19 animales y no encontraron ninguna cepa toxigénica. Si bien la resistencia las cepas a los antimicrobianos estudiados coinciden con los antibióticos utilizados con mayor frecuencia en las explotaciones porcinas, existen diferencias en los patrones de sensibilidad entre las granjas. Por lo cuál, es imposible generalizar el comportamiento de las cepas aplicando tratamientos empíricos sino que se deben realizar monitoreos de resistencia periódicos para saber como evolucionan las cepas de cada establecimiento en particular. Este trabajo preliminar aporta nueva información acerca de la distribución de STEC y ETEC en granjas de producción porcina de la Provincia de Buenos Aires y brinda un mejor conocimiento sobre la epidemiología y los patrones de sensibilidad de este grupo bacteriano frente a los antimicrobianos utilizados con mayor frecuencia tanto en medicina veterinaria como en medicina humana.