Efecto del zinc sobre la integridad estructural y funcional de la membrana plasmática del espermatozoide bovino descongelado y su capacidad de unión a la zona pelúcida.

GALARZA E; MATTIOLI G; FURNUS CC; ANCHORDOQUY JM; ANCHORDOQUY JP; FAZZIO LE

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; 3 ° Congreso Internacional de la Sociedad Argentina de Tecnologías Embrionarias; 2016

El zinc (Zn) es un mineral traza esencial involucrado en una gran variedad de procesos fisiológicos incluyendo la estabilidad de membranas celulares. La suplementación oral con este mineral en el bovino mejora el porcentaje de espermatozoides vivos y su motilidad individual. El objetivo del presente estudio fue evaluar el efecto de la suplementación con distintas concentraciones de Zn en el medio de fertilización in vitro (FIV) sobre la integridad estructural y funcional de la membrana plasmática del espermatozoide bovino descongelado, y su capacidad de unión a la zona pelúcida (ZP). El semen descongelado fue incubado en medio Fert-TALP conteniendo 0 (control); 0,4; 0,8; y 1,2 µg/ml de Zn en estufa gaseada a 39°C con 5% de CO₂ y humedad a saturación. Para evaluar la integridad (vitalidad espermática) y funcionalidad de la membrana se utilizó la técnica de coloración con eosina-nigrosina y la prueba de HOST (hypo-osmotic swelling test), respectivamente. El semen fue evaluado a las 0, 3 y 6 hs. Para evaluar la capacidad de unión de los espermatozoides a la ZP, el semen fue coincubado con ovocitos inmaduros desnudos por 2hs, luego los ovocitos fueron lavados y teñidos con Hoescht 33342. El conteo de espermatozoides unidos a la ZP se hizo con microscopio de epifluorescencia. Los datos de vitalidad y funcionalidad de la membrana fueron analizados con una regresión logística utilizando el procedimiento GENMOD (SAS Institute, Cary, NC). Los datos de unión de espermatozoides a ZP se analizaron mediante una regresión lineal mixta (SAS 9.0). Los resultados se muestran en la Tabla 1.Tabla 1. Efecto del zinc sobre la integridad estructural y funcional de la membrana plasmática del espermatozoide bovino descongelado y su capacidad de unión a la zona pelúcida. TratamientoVitalidad (%) Host (%) N° Espermatozoides 0 hs3 hs6 hs 0 hs3 hs6 hs unidos a ZPControl82,6a74,50bc64,00e 39a18,2b17,5b 9,6 ± 4,8a0,4 µg/ml Zn82,4a74,87bc67,12de 36,7a19,5bc18,7bc 25,4 ± 5b0,8 µg/ml Zn81,9a77,50b69,00cd 38a24,7c23,2c 42,1 ± 5,2c1,2 µg/ml Zn82,9a77,12b71,00c 40,7a18,7b19,7bc 16,9 ± 5,9abLos datos de Vitalidad son expresados como porcentajes [espermatozoides sin colorear (vivos)/ total].a-d son diferentes (P ˂0,05). Los datos de Host son expresados como porcentajes (espermatozoides reactivos/ total).a-c son diferentes (P ˂0,05).) Los datos de N° de Espermatozoides unidos a ZP (zona pelúcida) se expresan como el promedio ± ESM.a-c son diferentes (P ˂0,05).En conclusión, este estudio indica que el agregado de 0,8 µg/ml de Zn al medio de FIV favorece la integridad estructural y funcional de la membrana plasmática del espermatozoide bovino descongelado, y su capacidad de unión a la zona pelúcida.