Concentraciones elevadas de Cobre producen daño en el ADN y apoptosis en las células del cúmulus del bovino.

ANCHORDOQUY JM; SIRINI MA; ANCHORDOQUY JP; FURNUS C; NIKOLOFF N; PASCUA AM

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; 3 ° Congreso Internacional de la Sociedad Argentina de Tecnologías Embrionarias; 2016

Sociedad Argentina de Tecnologías Embrionarias

El cobre (Cu) juega un rol fundamental en las células de mamífero como cofactor de metaloenzimas involucradas en la protección antioxidante, metabolismo del hierro, y múltiples procesos metabólicos. Sin embargo, la misma propiedad redox que lo vuelve un elemento esencial contribuye a su toxicidad. Durante la maduración, el ovocito se encuentra rodeado por las células del cúmulus (CC). Las CC participan en la maduración del ovocito y en su capacidad de desarrollo embrionario posterior. El objetivo de este trabajo fue estudiar el efecto de concentraciones elevadas de Cu sobre la tasa de apoptosis y daño en el ADN de CC cultivadas in vitro. Los complejos ovocito-cúmulus fueron aspirados de ovarios bovinos de frigorífico y madurados en medio TCM-199 con 10% SFB a 39°C en 5% de CO2 y humedad a saturación por 24 hs. El medio fue suplementado con concentraciones crecientes de Cu (0; 120; 240 y 360 µg/dl Cu) todas ellas superiores a la concentración fisiológica adecuada (60 µg/dl Cu). El porcentaje de CC con daño en el ADN y la tasa de apoptosis fueron evaluadas mediante el Ensayo Cometa y Anexina-V-Fluos, respectivamente. La técnica de anexina permite diferenciar células vivas (sin colorear), células apoptóticas (color verde) y células necróticas (color verde y naranja). Los datos fueron analizados con una regresión logística utilizando el procedimiento GENMOD (SAS Institute, Cary, NC). Los resultados se muestran en la Tabla 1. Tabla1. Daño en el ADN y tasa de apoptosis de CC cultivadas in vitro con altas concentraciones de Cobre TratamientoCC con daño en el ADN (%)CC apoptóticas(%)CC necróticas(%)CC vivas(%)Control10a8,6a15.6a75.6a120 µg/dl Cu17b15.3b15.6a69.0b240 µg/dl Cu20b15.2b27.8b56.9c360 µg/dl Cu19b13.5b34.8c51.6d Los datos son expresados como porcentajes (%).a-c valores en la misma columna son diferentes (P ˂0,05).En conclusión, altas concentraciones de Cu elevan el daño en el ADN y la tasa de apoptosis en CC cultivadas in vitro.