ROL ANTIOXIDANTE DEL ZINC EN EL SISTEMA REPRODUCTOR BOVINO: EFECTO DE TRES HORMONAS REPRODUCTIVAS EN LAS CÉLULAS DEL CÚMULUS

PASCUA AM; ANCHORDOQUY JM; NIKOLOFF N; FURNUS CC; ANCHORDOQUY JP

Taller; III Taller de Biología Celular y del Desarrollo; 2016

Las especies reactivas de oxígeno (EROs) se producen espontáneamente en los organismos aerobios y, en altas dosis, inducen el denominado estrés oxidativo. Entre los sistemas de defensa que contrarrestan los efectos oxidantes de estas especies, se encuentra la enzima superóxido dismutasa, que contiene cobre y zinc (Zn) como cofactores (Cu/ZnSOD). Trabajos realizados en nuestro laboratorio demostraron que la suplementación con Zn en el medio de maduración in vitro (MIV) del complejo ovocito-cúmulus (COC) bovino incrementa la actividad de SOD. En este marco, se evaluó la influencia de las hormonas estradiol (E2), folículo estimulante (FSH) y luteinizante (LH) sobre los niveles de EROs de las células del cúmulus luego de la MIV en presencia de Zn. Para ello, los COCs se maduraron durante 24 horas bajo los siguientes condiciones: (1a) Medio de MIV suplementado con hormonas (E2 21& microg/ml, FSH 1µg/ml, LH 10µg/ml) y 120 µg/dl de Zn (suplementación adecuada propuesta por Kincaid (1999) y, (1b) Medio de MIV suplementado con hormonas en ausencia de Zn. Se realizaron controles sin hormonas: (2a) bajo suplementación con Zn y (2b) sin suplementación con Zn. Posteriormente, se separaron las células del cúmulus de los ovocitos y se llevó a cabo la tinción de las mismas con el fluoróforo 2,7-diclorofluoresceína que es un indicador de EROs. El análisis y la comparación de la intensidad de la fluorescencia se llevaron a cabo mediante el software Image J. Los niveles de fluorescencia fueron de mayor intensidad en las células maduradas sin hormonas en ausencia de Zn, seguido por el tratamiento sin hormonas con Zn, luego el tratamiento bajo suplementación hormonal sin Zn y, por último, con el menor grado de fluorescencia, el de suplementación hormona l más Zn. Se registraron diferencias significativas (p< 0.05) entre todos los tratamientos, a excepción de aquellos que no incluían el agregado de hormonas. El análisis estadístico de los datos se realizó mediante una regresión lineal mixta con el procedimiento MIXED de SAS 9.0 (SAS Inst. Inc.). Estos resultados respaldan la condición antioxidante del Zn en su papel de cofactor SOD, mostrando además que su acción estaría vinculada a la situación hormonal.