IGEVET   21075
INSTITUTO DE GENETICA VETERINARIA "ING. FERNANDO NOEL DULOUT"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
DESARROLLO DE MÉTODOS DE GENOTIPIFICACIÓN POR PIROSECUENCIACIÓN DE CINCO GENES BOVINOS RELACIONADOS CON MARMOLEO
Autor/es:
RIPOLI, MV; ROGBERG MUÑOZ, A; VILLARREAL, E; LIRÓN, JP; GOSZCZYNSKI, DE; GIOVAMBATTISTA, G
Lugar:
Santiago
Reunión:
Congreso; Congreso de la Asociación Latinoamericana de Genética (ALAG) 2010, XXXIX Congreso Argentino de Genética; 2010
Institución organizadora:
Sociedad Chilena de Genética
Resumen:
El marmoleo es una característica importante de la carne que contribuye al valor de la misma en los mercados internacionales. Los genes bovinos DGAT1, TG, GHr, LEP y FABP4 han sido asociados con marmoleo en diferentes razas bovinas. Diversos métodos (PCR-RFLP, PCR-SSCP, Tetra primer ARMS-PCR) han sido desarrollados para tipificar los polimorfismos ubicados en dichos genes. Estas metodologías manuales no permiten su automatización y limitan el número de animales analizados. El objetivo del presente trabajo consistió en desarrollar métodos para tipificar las mutaciones basados en la tecnología de pirosecuenciación. Para cada gen analizado se diseñaron dos primers externos para la PCR y un primer interno adyacente a la mutación para la reacción de pirosecuenciación. El producto de amplificación se purificó mediante sílica utilizando la plataforma de trabajo provista por el equipo PSQ 96MA en el cual se realizó la reacción de pirosecuenciación. Los resultados se analizaron con el programa PSQ 96MA 2.1.1. La técnica fue validada mediante la tipificación de muestras de ADN previamente analizadas por PCR-SSCP, PCR-RFLP y secuenciación directa. Dado que la pirosecuenciación es un método de tipificación rápido, de alta fidelidad y que permite el análisis de un polimorfismo a gran escala, resulta de gran utilidad en estudios de asociación y procesos de selección a nivel comercial en bovinos.