Efectos de inhibidores del estallido respiratorio sobre la producción de óxido nítrico por neutófilos humanos.

CARRERAS MC; RIOBÓ N; DEL BOSCO CG; PODEROSO JJ

Mar del Plata

Congreso; XL Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 1995

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Objetivo: El objetivo de este trabajo es comparar el efecto de inhibidores del estallido respiratorio sobre la producción de NO y de peróxido de hidrógeno (H2O2) por neutrófilos humanos estimulados con forbol ésteres (PMA) o formil péptidos (fMLP). Métodos: Las muestras fueron preincubadas sin calcio y sin magnesio a 37°C con concentraciones crecientes de los inhibidores. El NO fue medido por la oxidación de la oximioglobina y el H2O2 fluorométricamente con ácido p-hidroxifenilacético, ambos se expresaron en nmol.min-1.106 céls y correspondieron a n = 4 para cada experimento. Resultados: La preincubación con isoproterenol o adenosina (antagonista del estallido respiratorio), a las máximas concentraciones (100 y 500 mM durante 5 minutos), disminuyó la producción de H2O2 un 80 y 100% respecto a controles (C) estimulados con 1 mM fMLP solamente (C: NO: 0,23  ± 0,02 y H2O2: 0,87 ± 0,08), mientras que el NO disminuyó solo con adenosina (50%). Las toxinas colérica (TC) y pertussis (50 y 10 mg/ml durante 30 y 60 minutos respectivamente) inhibieron totalmente la producción de H2O2 pero solamente la TC inhibió la de NO un 56%. La genisteína (25 mg/ml durante 30 minutos), inhibidor de la tirosinquinasa, inhibió marcadamente la liberación de H2O2 en presencia de fMLP, mientras que con PMA la disminuyó ligeramente. En contraste, la liberación de NO aumentó 160 y 300% con los respectivos estímulos (C con 0,1 mg/ml PMA: 0,66 ± 0,02). Conclusiones: Los resultados obtenidos sugieren una divergencia en el camino de transducción de señales de la NO sintetasa y la NADPH oxidasa. La activación de la tirosinquinasa parecería reducir marcadamente la liberación de NO durante el estallido respiratorio.