Rol de la mtnos en un modelo de sindrome metabolico en ratones ob-/- rol de la mtnos en un modelo de sindrome metabolico en ratones

HOLOD S; FINOCCHIETTO P; BARREIRO F; CARRERAS MC; PODEROSO JJ

Mar del Plata

Congreso; LI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica.; 2006

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

El síndrome metabólico se asocia a resistencia insulínica, aumento del tejido adiposo y anormalidades mitocondriales. El óxido nítrico (NO), molécula de señalización celular y mitocondrial, modula la transferencia de electrones y el consumo de oxígeno. En nuestro laboratorio demostramos que insulina aumenta y leptina disminuye la actividad de mtNOS. Objetivo: estudiar la modulación de la actividad y expresión de la mtNOS en el modelo de síndrome metabólico de ratones Ob -/- (deficientes de leptina) con y sin suplemento de leptina. Métodos: Ratones Ob -/- y C57BL/6 (6-9 meses) fueron subdivididos en 4 grupos: control, Ob-/-,control + leptina, Ob + leptina (6ug c/12hs intraperitoneal durante 4 dias): Se extrajo grasa de periepidídimo, aislándose y purificándose las mitocondrias por centrifugación diferencial. El NO mitocondrial fue determinado por citometría de flujo y la expresión de mtNOS por Western Blot y RT-PCR. Las actividades del los complejos I-IV mitocondriales fueron medidos por espectrofotometría. El complejo I fue separado por un gel de poliacrilamida (BNPAGE). La nitración de tirosina se determinó por Western Blot. Resultados:1) Las mitocondrias de Ob-/- presentan el doble de actividad y expresión de mtNOS con respecto a controles. La actividad del Complejo I disminuyó 81% detectándose nitración de tirosina en sus componentes con respecto al control (p< 0.05); no hubo diferencias en las actividades de los complejos II-III y IV.3) Suplemento con leptina a Ob-/- normalizó las actividades de mtNOS y del complejo I reduciendo la nitración de tirosinas (2-3 veces). Conclusiones: a) Altas concentraciones de NO mitocondrial en tejido adiposo de los Ob-/- conduciría a nitración del complejo I, disminución de su actividad y reducción del consumo de oxígeno contribuyendo a la obesidad. b) En este modelo de síndrome metabólico, el hipometabolismo mitocondrial dependería del balance entre resistencia insulínica y la deficiencia de leptina.