Efecto del fMLP sobre la cinética de producción de radicales libres y óxido nítrico en neutrófilos humanos

CARRERAS MC; RIOBÓ N; PARGAMENT GA; PODEROSO JJ

Mar del Plata

Congreso; XXXIX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 1994

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Previamente hemos confirmado que los neutrófilos humanos (PMN) producen óxido nítrico (NO) y radicales libres del oxígeno en forma simultánea en presencia de forbol ésteres (PMA). El presente trabajo se realizó para estudiar efectos similares producidos por un estimulador fisiológico como la formil metionil leucil fenilalanina (fMLP). Los PMN fueron aislados de sangre venosa de voluntarios sanos. Se evaluaron distintos parámetros del estallido respiratorio en función de concentraciones crecientes de fMLP. El NO fue determinado por oxidación de la mioglobina reducida, el peróxido de hidrógeno (H2O2) fluorométricamente, el anión superóxido (O2-) por reducción del citocromo c, el consumo de oxígeno con un electrodo tipo Clark y la quimioluminiscencia inducida por lumninol como una medida de interacción de estas especies. Los resultados demostraron que el fMLP reproduce, en términos generales, el efecto dosis–respuesta del PMA; produciendo a 10-6 M la liberación simultánea máxima de NO (0.21 ± 0.01 nmol/min/106 PMN) y H2O2 (0.45 ± 0.08 nmol/min/106 PMN). El uso de inhibidores de la NO sintetasa (L-NIO 100 mM) aumentó la velocidad de producción de H2O2: 0.11 nmol/min/106 PMN (p<0.005), mientras que la superóxido dismutasa aumentó la velocidad de producción de NO 0.12 nmol/min/106 PMN (p<0.05), lo que implica la interacción NO/O2- y la consiguiente producción de peroxinitrito con este estímulo en neutrófilos humanos.