El óxido nítrico inhibe el complejo I mitocondrial a través de la formación de peroxinitrito

RIOBÓ N; MELANI M; BOVERIS A; PODEROSO JJ

Mar del Plata

Congreso; XLIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 1999

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

La exposición de ciertos tipos celulares a bajas concentraciones de óxido nítrico (NO), conduce a la inhibición irreversible del complejo I mitocondrial (NADH-Q10 reductasa). Con el objeto de analizar si el peroxinitrito (ONOO-), formado por reacción del NO y el anión superóxido (O2-) generado en la cadena respiratoria, contribuye al mecanismo de inhibición, realizamos experimentos en mitocondrias y partículas submitocondriales (PSM) aisladas de diferentes tejidos de rata. La incubación de mitocondrias (1 mg/ml) o PSM (0,1 mg/ml) de hígado con 1 – 5 pulsos de 0,5 mM NO en presencia de sustrato de complejo I (6 mM malato / glutamato o 0.1 mM NADH) o de complejo II (6 mM succinato), inhibió selectivamente el consumo de O2 dependiente de complejo I (n = 3). Del mismo modo, la incubación de PSM de corazón y cerebro con succinato y 1 mM NO (liberado por DETA-NO) inhibió la actividad NADH-Qo reductasa (85 ± 10.4 vs 19.3 ± 5.2 mM QoH2 min-1 mg prot-1, n = 6, p<0.05), que fue prevenida por 10 mM SOD y 2 mM ácido úrico (atrapador de ONOO-) pero no modificó la actividad succinato-Qo reductasa. La formación de ONOO- en PSM de hígado expuestas a 1 mM NO por 1 y 2 hs se detectó por Western blot con anticuerpos antinitrotirosina. La inhibición del complejo I se correlacionó con la producción de O2- y de ONOO- de cada tejido. Los resultados indican que el mecanismo de inhibición del complejo I por NO implica la formación de ONOO- intramitocondrial.