La disminución de la óxido nítrico sintasa mitocondrial se halla asociada a alteraciones oxidativas en tumores murinos

GALLI S; SCHÖPFER F; CARRERAS MC; BAL DE KIER JOFFÉ ED; PODEROSO JJ

Mar del Plata

Congreso; XLVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2001

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Las mitocondrias tumorales muestran alteraciones funcionales. El óxido nítrico (NO) producido  por la óxido nítrico sintasa mitocondrial (mtNOS) aumenta la producción de especies activas del  O2. El objetivo fue estudiar mtNOS, el estado redox y la funcionalidad de las mitocondrias de  tumores murinos (M3, MM3 y P07). Se determinaron la actividad de los complejos mitocondriales  (espectrofotometría) la velocidad de producción de peróxido de hidrógeno (H2O2)  (espectrofluorometría) y la actividad y expresión de la mtNOS (3HL-Cit y western blot) en dos  poblaciones mitocondriales (F1 y F2). La actividad de los complejos I-III y II-III se halló  disminuida (mama 276±10 y 51±1; F1: M3 127±15 y 46±2; MM3 67±6 y 14±1 nmol cit. c  red/min.mg prot, respectivamente) y asociada a una menor producción de H2O2 con antimicina.  Exceptuando la fracción PO7 (2),  los tumores expresaron menos mtNOS: control 1, M3 0.48  (F1), 0.63 (F2), MM3 0.25 (F1), 0.31 (F2) y P07 0.44 (F1) (UA) y su actividad se halló  marcadamente disminuida en todas las fracciones: mama normal 18.3; M3 5.1 (F1) y 7.7 (F2);  MM3 0 (F1) y 2.2 (F2); P07 0 (F1) y 1.1 (F2) (pmol L-Cit/ min.mg prot). La producción de  H2O2 dependiente de NO fue poco estimulada por L-Arg en las fracciones tumorales (MM3 0  (F1); MM3 0.023 (F2); M3 0.02 (F1); P07 0.017 (F1), hígado normal 0.14±0.09 nmol H2O2  /min.mg prot). La menor producción de H2O2 en mitocondrias tumorales se vincula con  alteraciones en la maquinaria oxidativa y la producción de NO.