INVESTIGADORES
PODEROSO Juan Jose
congresos y reuniones científicas
Título:
La activación de ERK1/2 mitocondrial es estrictamente requerida para la esteroidogénesis dependiente de pka en células MA-10
Autor/es:
PODEROSO C; CONVERSO D; GALLI S; RODRÍGUEZ V; PAZ C; CARRERAS MC; PODEROSO JJ
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LI Reunión Científica Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2006
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Resumen:
La etapa temprana de la esteroidogénesis ocurre en mitocondria e involucra la activación de la proteína StAR (Steroidogenic Acute Regulatory) que participa en el transporte de colesterol a la membrana mitocondrial interna, paso limitante en la síntesis de esteroides. Nuestro grupo y otros han descripto que ERK1/2 (extracellular signal-regulated kinases, una MAP quinasa) se activa por fosforilación en mitocondria. Con el objetivo de investigar efectos de ERK1/2 mitocondrial en la esteroidogénesis, células MA-10 (línea de células de Leydig murinas) se estimularon con hCG (Gonadotrofina Coriónica humana) u 8Br-AMPc (análogo permeable del AMPc) en presencia o ausencia de inhibidores de MEK1/2 (ERK1/2 quinasa), PD98059 (PD) y U0126 (U0). Ambos compuestos inhibieron la esteroidogénesis estimulada hormonalmente sin afectar los valores basales de esteroides, a los 15 minutos: control=0,14± 0,06; 8Br-AMPc=0,7 ± 0,14; 8Br-AMPc + PD=0,21 ± 0,07; 8Br-AMPc + U0=0,18 ± 0,03 y a los 60 min.: control=0,17 ± 0,03; hCG=5,28 ± 1,70; hCG + PD=0,82 ± 0,26; hCG + U0=0,47 ± 0,15; 8Br-AMPc=3,16 ± 0,80; 8Br-AMPc +PD=0,21 ± 0,06; 8Br-AMPc + U0=0,21± 0,05 ng de progesterona/ml (p< 0,05). Se observó la fosforilación de ERK1/2 siendo máxima a los 5 minutos de estimulación disminuyendo a niveles basales a 1 hora sin afectar la cantidad de ERK1/2 total. Una curva de activación similar se encontró en fracciones mitocondriales puras, detectada por inmunoblot o por inmunohistoquímica. La activación de MEK1/2 también fue observada en mitocondrias de MA-10 estimuladas con 8Br-AMPc, consecuente con el perfil de activación de ERK1/2 mitocondrial. La fosforilación en mitocondria tanto para MEK1/2 como ERK1/2 por AMPc fue inhibida por H-89, inhibidor permeable de PKA. En base a estos resultados, se infiere que la activación sostenida de MEK1/2 y ERK1/2 en la mitocondria vía PKA se requiere para el transporte de colesterol dependiente de StAR y esteroidogénesis estimulada hormonalmente en células MA-10.