INVESTIGADORES
PODEROSO Juan Jose
congresos y reuniones científicas
Título:
Actividad de la DT-diaforasa en el pulmón de ratas sépticas y su modificación por peroxinitrito.
Autor/es:
FINOCCHIETTO P; SCHÖPFER F; PERALTA J; PODEROSOJJ
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; XLIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 1999
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Resumen:
La DT-Diaforasa (DTD) es una enzima que cataliza la reducción de la ubiquinona (CoQ) a ubiquinol (CoQH2) y regenera su capacidad antioxidante. Dado que CoQH2 es un antioxidante reconocido se propone una nueva acción protectora ante el peroxinitrito: ONOO- (factor de daño tisular en el ARDS). El propósito de este trabajo fue observar la actividad en la sepsis post peritonitis fecal y su potencial modificación por el ONOO-. En ratas Sprague-Dowley de peso 220 – 250 g (n = 16) se efectuó la ligadura del ciego y doble punción (2CLP) y se obtuvieron muestras de pulmón a las 4 y 16 horas de la 2CLP, y en ratas controles. Los tejidos fueron homogeneizados y se determinó la actividad de la DTD en el sobrenadante a 8000g mediante la reducción de DCPIP por NADPH respecto de la inhibición por dicumarol expresándose en nmoles/min/mg de proteína. In vitro se expuso el sobrenadante de 8000 g a cantidades crecientes de ONOO- (50-400 mM). Se observó que la actividad de DTD se incrementó en forma significativa (p<0.05, ANOVA, test de Dunnet) a las 4 hs de 2CLP (342 ± 42, n = 6 vs controles 92 ± 7, n = 4), disminuyendo a las 16 hs de sepsis (185 ± 34, n = 4) y fue inhibida por ONOO- (IC50=150mM). Se concluye que la actividad de DT diaforasa en el pulmón aumenta durante la primera fase de la sepsis posiblemente como un mecanismo de protección, pero su actividad puede resultar afectada durante la evolución de la misma por acción del peroxinitrito.