El aumento de mtNOS contribuye al estrés oxidativo en el envejecimiento.

CONVERSO DP, LEVISMAN DM, CARRERAS MC, PODEROSO JJ.

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LII Reunión Científica Sociedad Argentina de Investigación Clínica.; 2007

Sociedad Argentina de Investigación Clínica.

El proceso de envejecimiento se debe a un aumento en la producción de radicales libres junto a una perdida de las defensas antioxidantes. Por otra parte se sabe que el oxido nítrico (NO) tiene una importante acción sobre la función mitocondrial, y que son estas organelas las mayores productoras de radicales en la células. Con esto presente se quiere establecer si un aumento de NO en la mitocondria durante el envejecimiento contribuye a este proceso, como se regula dicho aumento y cual sería su efecto sobre las células. Se utilizó hígado de ratas Wistar de 3 (C) y 24 (O) meses. Se midió la actividad de oxido nítrico sintasa mitocondrial (mtNOS) por conversión de [H3]L-Arg a [H3]L-Cit, observándose un aumento del 100% a los 24 meses (C:24+3 vs O:44+6 pmoles/min.mgprot, p<0.05), acompañado por un incremento en la expresión de la enzima. Ese hecho concuerda con la disminución a los 24 meses en la expresión de hemoxigenasa I, enzima que regula negativamente a la mtNOS. La funcionalidad mitocondrial se evaluó mediante la actividad de los complejos de la cadena respiratoria, seguida por reducción u oxidación de citocromo c. Se observo una pérdida de actividad del 40% (C:341+48 vs O:203+19 nmoles/min.mgprot, p<0.05) en el complejo I-III. Así mismo, la actividad de la superoxido dismutasa (MnSOD) mitocondrial se encontró disminuida a los 24 meses (C:1394+95 vs O:921+11 pmoles/min.mgprot, p<0.05). Estos hallazgos contribuyen al aumento de anión súper oxido (O2-), el cual se puede combinar con NO produciendo peroxinitrito (ONOO) capaz de nitrar proteínas. Mediante western blot se observó un aumento en la nitración de proteínas mitocondriales en los animales añosos, identificándose la nitración del complejo I y de Mn-SOD. Con estos resultados se concluye que en el envejecimiento hay un aumento en la producción de NO y O2- que no puede ser revertido por las defensas antioxidantes, favoreciendo la formación de ONOO- que modifica a proteínas mitocondriales perdiendo funcionalidad.