INVESTIGADORES
PODEROSO Juan Jose
congresos y reuniones científicas
Título:
Modulación de la traslocación de iNOS a mitocondria por chaperonas eucariotas
Autor/es:
GONZÁLEZ A; HOLOD S; FRANCO MC; PODEROSO JJ; CARRERAS MC
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LI Reunión Científica Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2006
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Resumen:
En estudios preliminares hemos observado que en la endotoxemia experimental, iNOS trasloca a mitocondria y podría ser un factor fisiopatogénico mayor en el deterioro multiorgánico de la sepsis grave. Con el propósito de analizar los mecanismos subyacentes, estudiamos ratas Wistar sometidas a endotoxemia experimental (E) (10 mg LPS/kg, IP) o ligadura cecal y doble punción (LCP) (n=4-6/grupo), el hígado fue extirpado y las mitocondrias aisladas y purificadas en diferentes períodos (0-2-4-6-12-18 y 24 hs) post procedimiento. Se estudiaron parámetros de funcionalidad hepática, actividad de complejos mitocondriales I-IV, expresión de iNOS, nitración de proteínas mitocondriales, expresión de chaperonas HSP90, iHSP70 y HSP40 por Western blot. Los resultados demostraron que ambos modelos producen daño hepático severo con expresión de iNOS en la mitocondria con un pico a las 6 hs (E) o a las 12 hs (LCP), nitración de las proteínas mitocondriales y disminución marcada de actividad de complejo I (C: 93±3 vs 12 hs, LC: 39±9; E: 53±6 nmoles/min/mg prot, p< 0,05) y IV (C: 18±2 vs 12 hs, LC: 13±3; E: 13±2 k/min/mg prot). En ambos modelos se observó un aumento de HSP40 a 2-4 hs y una reducción en la expresión de HSP90 a 12-24 hs (chaperonas que podrían participar en la traslocación a la mitocondria). Asimismo, se observó a 12-24 hs un aumento de iHSP70 y de hemo oxigenasa I en citosol (chaperonas que regulan la transcripción de iNOS); paralelamente se observó la entrada de hemo oxigenasa I a la mitocondria que podría estar relacionada con la degradación de iNOS intramitocondrial por consumo del pool de hemo.Conclusiones:Los resultados demuestran a) que la traslocación persistente de iNOS a mitocondria produce severo daño hepático y b) que la modulación de las chaperonas podría participar en el control de la expresión de iNOS y en su traslocación a la mitocondria.
