INVESTIGADORES
PODEROSO Juan Jose
congresos y reuniones científicas
Título:
Stress oxidativo inducido por hipoxia/reoxigenación en el SNC en desarrollo: modulación de la expresión nNOS.
Autor/es:
GIUSTI S; CONVERSO D; PODEROSO JJ; FISZER DE PLAZAS S
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas; 2004
Institución organizadora:
SAIC, SAI, SAFE, SABiología, SABiofísica, SAN, SAF
Resumen:
El SNC en desarrollo es especialmente sensible a los daños inducidos por la disminución en la tensión de oxígeno. Las especies reactivas del oxígeno y del nitrógeno, cuya formación puede inducirse por eventos de hipoxia/reoxigenación, intervienen en procesos de amplificación del daño modulando la expresión y/o actividad de enzimas, y produciendo daños oxidativos en macromoléculas. El objetivo del presente trabajo ha sido evaluar la modulación de la expresión de la enzima nNOS y medir indicadores de stress oxidativo en el lóbulo óptico de embriones de pollo en el día embrionario (DE) 12 sometidos a una hipoxia aguda prenatal (8% [O2], 60 min.) seguida de distintos tiempos de reoxigenación: 1hs., 2hs., 3hs., y 4hs. Se cuantificó la expresión de nNOS en fracciones citosólicas y mitocondriales mediante la técnica de Western blot. Como indicadores de stress oxidativo de midieron los cambios en la actividad del Complejo Respiratorio IV mediante la producción de citocromo c oxidado a 550 nm y la proporción de proteínas nitrosiladas por Western blot. Los resultados obtenidos muestran un aumento máximo en la expresión de nNOS durante la hipoxia y la primera hora de reoxigenación volviendo a valores normales en los tiempos posteriores. Este aumento fue de 37% en la fracción citosólica y de menor magnitud en la fracción mitocondrial. Además, se observó un aumento en la actividad del Complejo IV del 40% (p<0.007) en tiempos coincidentes con el aumento de la expresión de nNOS. Por último, en el análisis de nitrosilación de proteínas se observa durante los tiempos de reoxigenación un aumento de la intensidad de las bandas y la aparición de bandas nuevas. En conclusión, los resultados muestran que los eventos de hipoxia/ reoxigenación inducen un aumento en la expresión de nNOS en citosol y mitocondrias. El aumento concomitante de oxido nítrico se asocia la activación del Complejo IV y al aumento en la nitrosilación de proteínas.