Actividad bactericida de los neutrófilos en pacientes sépticos evaluada por cuantificación colorimétrica de la reducción estimulada del azul de nitrotetrazolio (NBT).

GOLDEMBERG DBI; PODEROSO JJ; MERELLI A; PICO JC; CONTARDI NW DE; PALAZZO JL; GHERARDI CR; JORGE MA

Bermejo, Mendoza

Congreso; XXV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 1980

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Al importante compromiso sistémico que tienen los pacientes con sepsis grave, puede asociarse una disminución de los mecanismos de defensa en los componentes celular o humoral del sistema fagocitario. El presente trabajo tuvo por objeto evaluar la actividad bactericida de los neutrófilos en dichos pacientes, mediante una prueba estimulada de reducción del azul de nitrotetrazolio (NBT). Los métodos para la medición de la actividad bactericida suelen ser laboriosos o de alto costo, por lo que se adoptó la técnica de Stossel en la cual se introdujeron modificaciones. Su principal ventaja es la de ser colorimétrica, lo que permite su cuantificación. El fundamento de la misma consiste en hacer contactar una suspensión de neutrófilos estimulados en concentración conocida con NBT, que posee la propiedad de convertirse en formazán en un medio reductor, compitiendo con el oxígeno por la captación de neutrones. Las partículas estimulantes utilizadas fueron Staphilococcus epidermis, catalasa positivos. La elección del Staphilococcus epidermis como factor estimulante en lugar de partículas de látex, se basa en la fácil obtención de dicho germen en el medio hospitalario; y en el intento de reproducir en alguna medida una actividad biológica de la función bactericida del neutrófilo. El formazán (compuesto azul e insoluble) se extrae con dioxano y se lee en el espectrofotómetro a 525 nanómetros. La densidad óptica es directamente proporcional a la actividad bactericida, y se expresa como microgramos de formazán /107 neutrófilos (mg/107). El estudio se realizó en 18 controles y 11 pacientes. Los estudios revelaron una actividad bactericida de 215.44 ± 18.78 para los controles, y de 82.56 ± 16.04 para los pacientes (p<0.001). Estos datos demuestran una inhibición en la magnitud de la respuesta neutrófila en la sepsis severa, que contrasta con los valores altos de reducción del NBT observados en procesos infecciosos de menor gravedad. La naturaleza de dicha inhibición sería más precisa de contar con controles de neutrófilos no estimulados por Staphilococcus epidermis en ambos grupos normales y sépticos.