Extractos de Trichocline sinuata (Asteraceae), ?árnica del campo? con alto potencial en inactivación fotodinámica

FRANCISCO CECATTI; MATÍAS FUNES.; PAULINA CARDOSO SCHIAVI; ELISA PETENATTI; MAXIMILIANO SORTINO

San Miguel de Tucuman

Congreso; III Reunión de Fotobiólogos Moleculares Argentinos ?GRAFOB DEL BICENTENARIO?; 2016

GRAFOB

Extractos de Trichocline sinuata (Asteraceae) con alto potencial en inactivación fotodinámicaExtracts from Trichocline sinuata (Asteraceae) with high potential in Photodynamic Inactivation Paulina Cardoso Schiavi2, Francisco Cecatti1, Maximiliano Sortino3, Elisa Petenatti2, Matías Funes1matiasdfunes@gmail.com1 INTEQUI, Área Química Orgánica-FQBF-UNSL2 Área Botánica-FQBF-UNSL3Farmacognosia-Micología-FCBF-UNR1. IntroducciónLas plantas son una importante fuente de diversidad química proporcionando oportunidades ilimitadas para el aislamiento de nuevos compuestos o la generación de extractos fotoactivos con alto potencial antimicrobiano [1]. Si bien la medicina ha logrado la sobrevida de pacientes inmunodeprimidos (transplantados, SIDA, etc.), un alto porcentaje muere debido infecciones microbianas [2]. Las drogas disponibles para el tratamiento de micosis superficiales o sistémicas manifiestan una alta toxicidad, producen recurrencia o llevan al desarrollo de resistencia por parte de los agentes patógenos [3]. La urgencia por encontrar nuevos antimicrobianos ha llevado a los científicos a desarrollar nuevas alternativas terapéuticas para la inactivación de estas especies patógenas; debido a esto una gran cantidad de estudios han reportado el uso de compuestos fotoactivos extraídos de plantas para la fotoinactivación de hongos y bacterias, entre ellos los psoralenos [4].2. ObjetivoDeterminar el potencial fotoinactivante de extractos de partes aéreas y subterráneas de Trichocline sinuata (Asteraceae) sobre Cándida albicans.3. Materiales y métodos3.a) Se recolectaron partes aéreas y subterráneas de T. sinuata (?árnica del campo?).3.b) El material vegetal seco y molido se extrajo sucesivamente a 25°C con hexano, diclorometano, éter, acetato de etilo y metanol.3.c) Producción de especies reactivas de oxígeno (ROS): Se determinó si los procesos fotooxidativos se debían a la acción del 1O2 empleando L-triptófano como sustrato, o a la acción de O2.- siguiendo la absorbancia a 540 nm del Azul de Tetrazolio. En ambos casos los extractos fueron irradiados con luz UVA.3.f) Se observó la fotoinactivación de Cándida albicans, aplicando un método de microdilución en caldo con irradiación de luz UVA. 4. ResultadosSe pudo determinar que la irradiación con UVA de los extractos DCM y Éter de partes aéreas de T. sinuata produjeron 1O2, mientras que los de parte subterráneas no fotooxidaron al triptófano. También se pudo constatar que los extractos DCM, Éter y AcEt de partes aéreas produjeron O2.- mientras que los extractos Etér y AcEt de la parte subterránea reducen NBT. El análisis de los espectros UV de cada uno de estos extractos presentan bandas características de esqueletos furanocumarínicos. Empleando cromatografía HPLC-DAD y patrones se pudo determinar que los extractos están constituidos principalmente de Xantotoxina, Bergaptano y Trichoclina en distintas concentraciones. Una búsqueda de componentes minoritarios se realizó mediante CG-Masa, obteniéndose: Psoraleno, 8-hidroxipsoraleno e Isopimpinellina; también se halló Fenantreno y Cromeno. Los extractos fotoactivos se probaron como antifúngicos frente a Cándida albicas empleado luz UVA y se encontró que los extractos DCM, Éter y AcEt aéreos y el Etéreo subterraneo produjeron la inactivación de esta levadura a CIM menores a los 125 µg/mL, durante 1h de irradiación.5. ConclusionesDe lo observado se pudo determinar que los diferentes extractos de T. sinuata (planta nativa de las sierras de San Luis) presentan en su matriz una mezcla de diferentes psoralenos, lo que los hace más fotoactivos que los compuestos aislados frente a UVA. También se determinó que estos extractos son productores de ROS. Comparados con Metoxaleno, una droga fotoactiva comercial, estos extractos producen una fotoinactivación de Cándida albicans considerablemente mayor. Debido a esto podemos considerar a los extractos de T. sinuata como potenciales antifúngicos fotoactivos. Referencias[1] Bekhit A.E., Bekhit A.A. Natural Antiviral Compounds (Cap.7), 195?228, 2014. [2] Olomola T.O., Mosebi S., Klein R., Traut- Johnstone T., Coates J., Hewer R., Kaye P.T. Bioorganic Chemistry 57, 1?4, 2014.[3] Jara L.M., Cortés P., Bou G., Barbé J. Antimicrob. Agents Chemother, 59, 7, 4318-4320, 2015.[4] De Menezes H.D., Pereira A.C., Brancini G.T., De Leão H.C., Massola N.S., Bachmann J.L., Wainwright M., Bastos J.K., Braga J.U., J.Photochem. Photobiol. B, 131, 74?83, 2014.