INTEQUI   20941
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES EN TECNOLOGIA QUIMICA
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Modificación biocatalítica de esteroides:oxidación de Baeyer-Villiger selectiva sobre el anillo D.
Autor/es:
MASCOTTI ML; BISOGNO FR; LAPADULA W; JURI-AYUB M; KURINA SANZ M
Lugar:
La Plata
Reunión:
Encuentro; V EnReBB; 2012
Institución organizadora:
SAByB (Sociedad Argentina de Biocatálisis y Biotransformaciones)
Resumen:
La capacidad de los hongos filamentosos para transformar esteroides de la serie C19 ha sido ampliamente estudiada. Entre las bioreacciones más frecuentes se encuentran la hidroxilación de posiciones no activadas y la oxidación de grupos oxidrilos [1]. La oxidación de Baeyer-Villiger (BV) se ha observado con algunas cepas del género Aspergillus -A. terreus, A. tamarii- en la biotransformación de androsterona, progesterona y dehidro-epi-androsterona (DHEA) entre otros compuestos [2], estando condicionado el perfil de productos obtenidos a la funcionalización de los sustratos. En la búsqueda de nuevas cepas con actividad Baeyer-Villiger monooxigenasa (BVMO) se abordó el estudio de la biotransformación de DHEA, cortisona y otros esteroides empleando como biocatalizador A. parasiticus. La especie fue seleccionada por su capacidad de producir aflatoxinas, en cuya biosíntesis se involucran las BVMOs y debido a que en trabajos previos hemos demostrado su capacidad de oxidar estéreoselectivamente sulfuros [3] y el sustrato modelo [3.2.0] bicicloheptenona. Los perfiles de biotransformación obtenidos bajo diferentes condiciones de trabajo fueron analizados mediante GC-MS y posteriormente los productos purificados fueron caracterizados por 1H RMN y 13C RMN. Se evidenció que A. parasiticus es capaz de producir como producto mayoritario la lactona normal derivada de DHEA y otros metabolitos minoritarios. Este resultado pone en evidencia la capacidad de este microrganismo de llevar a cabo la reacción de BV. La biotranformación se llevó a cabo también a escala semipreparativa con muy buenos resultados, demostrando así la robustez del proceso. Posteriormente, mediante la búsqueda en bases de datos genómicas y de ESTs, se halló una secuencia con alta similitud de secuencia con otras BVMOs, la cual podría ser la responsable de la actividad observada. Alineamiento de múltiples secuencias y análisis de inferencias filogenéticas apoyan esta hipótesis. Actualmente, se encuentra en progreso el clonado y la expresión de dicha enzima para realizar su posterior caracterización como biocatalizador.