Prevalencia de beta-lactamasas de espectro extendido (BLEE) e Integron de Clase 1 en aislados clinicos provenientes de hospitales de Mendoza.

MARQUEZ F; SANCHEZ DG; NOLLY MB; DAMIANI MT

Congreso; I Congreso Interuniversitario Provincial; 2021

PREVALENCE OF EXTENDED-SPECTRUM β-LACTAMASES (ESBL) AND CLASS 1 INTEGRON IN CLINICAL ISOLATES FROM MENDOZA´S HOSPITALS.Marquez, Federico. Laboratorio de Bioquímica e Inmunidad, Instituto de Bioquímica y Biotecnología, Facultad de Ciencias Médicas, Universidad Nacional de Cuyo. 20305844625 ? Nolly, Mariela Beatriz. Laboratorio de Bioquímica e Inmunidad, Instituto de Bioquímica y Biotecnología, Facultad de Ciencias Médicas, Universidad Nacional de Cuyo. IMBECU-CONICET. 27253526551 ? Damiani, María Teresa. Laboratorio de Bioquímica e Inmunidad, Instituto de Bioquímica y Biotecnología, Facultad de Ciencias Médicas, Universidad Nacional de Cuyo. IMBECU-CONICET. 27172042339 ? Sánchez, Diego Germán. Laboratorio de Bioquímica e Inmunidad, Instituto de Bioquímica y Biotecnología, Facultad de Ciencias Médicas, Universidad Nacional de Cuyo. IMBECU-CONICET. 20274023903Resistencia -  Lactamasas - IntegronResistance ? β Lactamases ? IntegronLos β-lactámicos son antibióticos que contienen un anillo β lactama en su estructura molecular. Son muy eficaces ya que bloquean la síntesis de la pared celular bacteriana. Sin embargo, este beneficio antibiótico es limitado debido a mecanismos de resistencia bacteriana como las β-lactamasas. Las mutaciones en los genes que codifican estas enzimas permiten a las bacterias expandir los sustratos hidrolizados, recibiendo el nombre de β-lactamasas de espectro extendido (BLEE). TEM-1 y SHV-1 fueron las primeras β-lactamasas encontradas, luego CTX-M, PER, y finalmente las menos frecuentes VEB-1, BES-1, SFO-1, TLA-1, CME-1, GES/IBS, OXA, aumentando considerablemente la resistencia bacteriana. La resistencia a la β-lactamasas puede ser adquirida por las bacterias mediante transferencia vertical u horizontal. Estos elementos de genes de resistencia pueden incorporarse a casetes de genes dentro de los integrones, movilizados por fagos o plásmidos. Los integrones son plataformas de ensamblaje que incorporan genes a través de recombinación sitio específica. La diseminación de genes de resistencia a antibióticos por elementos genéticos es una preocupación creciente a nivel mundial. En especialmente aquellos relacionados con el integrón de clase 1, capaz de portar múltiples resistencias a antibióticos para la tercera/cuarta generación de cefalosporinas y carbapenémicos. El estudio de difusión de casetes de resistencia entre bacterias es un tema de extrema relevancia y conciernen a las políticas de administración de antibióticos. Las bacterias pueden sobrevivir a las condiciones adversas que se encuentran en el entorno hospitalario, y el uso de antibióticos las vuelve multirresistentes a varios antimicrobianos. Las infecciones nosocomiales se encuentran entre las complicaciones más comunes en las unidades de cuidados intensivos. Nuestro objetivo es determinar la aparición de betalactamasas de espectro extendido (BLEE) e integrones de clase 1 en aislados clínicos de hospitales locales mediante técnicas de PCR. Nuestra hipótesis reside en que las actividades de vigilancia son de importancia para identificar la prevalencia de estos genes, su asociación con la resistencia a los diferentes β-lactámicos y los posibles mecanismos para su transferencia. Esto nos permitirá proponer diagnósticos rápidos para los genes de mayor frecuencia basado en PCR, y brindar información relevante para tomar decisiones respecto al uso de antimicrobianos.El estudio se llevará a cabo con muestras de aislados clínicos de hospitales de Mendoza, con los que actualmente estamos colaborando. Se determinarán los siguientes parámetros: en el caso de cepas resistentes a β-lactámicos se determinará adicionalmente la presencia de genes que codifique para las distintas familias de BLEE; además se analizará la presencia o ausencia del integron clase I. Obtención y procesamiento de muestras: a partir de los aislados bacterianos procedentes del hospital se realizará la extracción de DNA genómico. Para evaluar nuestro objetivo por la técnica de PCR, utilizamos primers de secuencia conocida y específicos para cada gen de interés. Se analizó la expresión génica responsable del fenotipo BLEE, revelando una prevalencia de CTX-M1 en el 46,4% de las muestras, CTX-M2 en el 4% de las muestras y, finalmente, TEM-1 del 81,25% de las muestras para las cepas analizadas hasta el momento. Nuestros estudios muestran que 53 de las 68 cepas bacterianas obtenidas (78%) son positivas para integrones de clase 1. Además, los plásmidos fueron positivos en el 17% de las muestras examinadas hasta el momento. Según el Programa Nacional de Epidemiologia y Control de Infecciones Hospitalarias ?VIHDA? en el reporte anual de vigilancia de infecciones asociadas al cuidado de la salud del año 2019, encontraron en la unidad de cuidados intensivos de adultos que prevalecía Klebsiella pneumoniae y Pseudomonas aeruginosa. Mientras que en nuestra región los patógenos prevalentes en dicha fecha son Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli, no evidenciándose la presencia de Pseudomonas aeruginosa. A su vez con respecto al análisis de resistencia antimicrobiana, el VIHDA reporta la presencia de cepas de Klebsiella pneumoniae resistentes a carbapenems en un 41,26%, no evidenciándose en nuestra región dicha resistencia en los años analizados. En el presente estudio, 78% de las enterobacterias seleccionadas presentaron integrones de clase 1, cifra similar a la encontrada en otros lugares de América Latina (79%), pero elevada comparada con las reportadas en Europa en bacterias gram-negativas (43%), en el oriente de Asia (59.9%) y en Australia (49%). Nuestros resultados brindan una visión general de la prevalencia de genes con actividad BLEE y los posibles mecanismos de transferencia horizontal por los cuales estos genes fueron diseminados en los hospitales de Mendoza durante 2018 y 2019. La falta de avances en el desarrollo de antibióticos hace que este tipo de estudio de prevalencia sea fundamental para que las políticas de administración de antibióticos adquieran estrategias adecuadas para el tratamiento antimicrobiano que favorezcan la salud de los pacientes y a la población en general.