119) Disociación del efecto ansiolítico de la lesión hipocámpica en ratas. Hipocampo Ventral vs Dorsal.

LLANO LÓPEZ L, ; GENCO JM, ; ADAMEK P, ; GARGIULO PA.

Mendoza.

Jornada; XI Jornadas de Investigación 2010. Facultad de Ciencias Médicas. Universidad Nacional de Cuyo. Resúmenes.; 2010

Facultad de Ciencias Médicas. Universidad Nacional de Cuyo.

119) 2010. Llano López L, Genco JM, Adamek P, Gargiulo PA. Disociación del efecto ansiolítico de la lesión hipocámpica en ratas. Hipocampo Ventral vs Dorsal. XI Jornadas de Investigación 2010. Facultad de Ciencias Médicas. Universidad Nacional de Cuyo. http://fcm.uncu.edu.ar/jornadas2010/index.php/articulos/view/55   Disociación del efecto ansiolítico de la lesión hipocámpica en ratas. Hipocampo Ventral vs Dorsal. Llano Lopez, L ; Genco, JM ; Adamek, P ; Gargiulo, PA Laboratorio de Neurociencias y Psicología Experimental, Área de Farmacología, Facultad de Ciencias Médicas. UNCuyo. Mendoza, Argentina. Postulado a premio Inv. Joven en Cs.Básicas Objetivos El objetivo del presente trabajo es comparar la lesión excitotóxica con ácido N-Metil D-Aspártico (NMDA) del Hipocampo Ventral (Hip V) con la del Hipocampo Dorsal (Hip D) en tres tests que miden ansiedad con el fin de aportar resultados que puedan ayudar a discernir la función de cada zona del mismo. Se realizarán experimentos comparativos entre grupos de ratas normales y tratados con compuestos de acción neurotóxica. La disminución de la ansiedad ha sido relacionada con los síntomas secundarios de la esquizofrenia, particularmente el aplastamiento afectivo (Martínez y col., 2002 b).  Materiales y métodos Tres grupos de ratas cepa Holtzman (grupo control, lesión de HipV y lesión de Hip D) fueron sometidos a tres tests de ansiedad. El primero, “food neophobia test”, consiste en exponer al animal hambriento (en un 80% de su peso ideal) a dos tipos distintos de comida a los cuales nunca antes ha sido expuesto, durante tres días consecutivos cada uno, y se mide el tiempo que le toma al animal comenzar a comer. A cada animal se le presenta dos comidas nuevas (comida 1 y comida 2), durante tres días consecutivos, separados cada una por 2 días. La mitad de los animales son expuestos primero a la comida 1 y la otra mitad primero a la comida 2, para evitar factores externos que modifiquen el test (ejemplo: una comida de mejor gusto u olor), diseño experimental denominado contrabalanceado (“counterbalanced”). El segundo test consiste en el “Plus maze test”, donde el animal es sometido a explorar una encrucijada elevada a 50 cm del suelo, donde dos brazos del mismo están protegidos por paredes de 50 cm de alto, y dos brazos no poseen protección alguna, con el riesgo de caer al suelo desde dicha altura. Los parámetros a medir son: Tiempo de permanencia en brazos abiertos, número de entradas a brazos abiertos, número de entradas a brazos cerrados, tiempo por entrada al brazo abierto (siendo este el cociente entre tiempo de permanencia y número total de entradas al brazo abierto), cociente entre número de entradas a brazos abiertos y cerrados, y número de llegadas al extremo de los brazos abiertos (lugar de mayor ansiogénesis). El tercer test que se utilizará, es el “Black/White box”, donde el animal se coloca en una caja negra y pequeña, sin luz (reconfortante para el animal), contigua y comunicada a una caja de mayor tamaño, blanca y con luz potente (ansiogénico para el animal), donde los deseos del animal de explorar se ven afectados por el estímulo molesto de la luz y de un lugar más grande. Se medirá el tiempo que tarda el animal en llegar desde la caja negra al extremo opuesto en la caja blanca. Resultados Estadística Se realizó un test de Kolmogorov Smirnov para evaluar la distribución paramétrica de los diferentes grupos. Se utlizó ANOVA de mediciones repetidas y ANOVA uno según el caso, seguidos por Kruskal Wallis post test. En todos los casos, una p<0.05 (dos colas) fue considerada significativa. Los resultados son reportados como medias ± Error estandar de la media (SEM, n=10 para cada grupo). Food Neophobia Test No se observaron diferencias significativas en el tiempo utilizado en comer la comida entre los diferentes grupos (p>0.1), pero se observó un descenso significativo del mismo en todos los grupos con el correr de los días de experimentación (p<0.01) (ver fig.1). Durante los días de habituación al test (tres días), se midió la cantidad de movimientos de exploración efectuados por los animales (rearing) al pararse en sus dos patas traseras. Se observó un efecto significativo durante todos los días, dónde los animales con lesión dorsal mostraron mayor cantidad de rearings. Día 1: Hip Dorsal Lesion (HDL) vs Saline (p<0.001). Día 2: HDL vs Hip Ventral Lesion (HVL) (p<0.05). Día 3: HDL vs HVL (p<0.05) y HDL vs Saline (p<0.01) (ver fig2). Plus maze Test No se observaron diferencias significativas en ninguno de los parámetros medidos en este test entre los diferentes grupos (Time per entry, Time spent in the open arms, Open arm entries, Closed arm entries, Extreme arrivals or Open/Closed arm quotient, p>0.1). Black/White box Test Se observó una disminución en la latencia para llegar el extremo de la caja iluminada (estímulo ansiogénico) en el grupo con lesión en Hipocampo Dorsal en el segundo día de test. (p<0.01) (ver fig3) . Conclusión Concluimos que la lesión en el HipD provoca una conducta en la rata interpretada como aumento de la exploración con ansiolisis, y que dicho efecto no se observó en el grupo de ratas con lesión en HipV.   Imagen 1 Foodneophobia test. Se observa una disminución significativa del tiempo empleado en comer el alimento en todos los grupos con el correr de los días de experimentación. (p<0.01). Imagen 2 Foodneophobia test. Se observa un aumento significativo del número de rearings (movimientos de exploración) durante los días de habituación en el grupo con lesión del Hipocampo Dorsal. Día 1: Hip Dorsal Lesion (HDL) vs Saline (p<0.001). Día 2: HDL vs Hip Ventral Lesion (HVL) (p<0.05). Día 3: HDL vs HVL (p<0.05) y HDL vs Saline (p<0.01). Imagen 3 Black/White box test. Se observa una disminución significativa en la latencia para llegar el extremo de la caja iluminada (estímulo ansiogénico) en el grupo con lesión en Hipocampo Dorsal en el segundo día de test. (p<0.01).