Efecto de la cloroquina sobre la distribución de Catepsina D en células de cáncer de mama

PEREYRA L; SOSA MA; PERALTA S; CARVELLI L; VARGAS ROIG LM

Congreso; IV Reunión Conjunta de Sociedades de Biología de la República Argentina; 2020

Sociedades de Biología de la República Argentina

El cáncer de mama es una de las causas más importantes de mortalidad a nivel mundial. Las células de algunos tumores tienen incrementada su biogénesis lisosomal como respuesta a alteraciones en el metabolismo. Estos hechos repercuten en la integridad y/o funcionalidad lisosomal, donde se observan incrementados niveles de sus proteasas lisosomales, tales como catepsina D (CatD). En la mayoría de los tipos celulares, las proteínas lisosomales son conducidas desde el trans Golgi hacia los lisosomas por los receptores a manosa-6-fosfato (CD-MPR y CI-MPR) y una vez arribados a los compartimentos acídicos, estos se disocian del ligando y los receptores son reciclados. Se conoce que alteraciones en la membrana lisosomal conducen un escape de CatD al citoplasma desencadenando procesos apoptóticos. Esto posiciona a los lisosomas como un potencial blanco terapéutico contra las células tumorales. Las aminas acidotrópicas, poseen la paticularidad de acumularse en compartimentos lisosomales, y podrían inducir aumento en la permeabilidad de la membrana lisosomal, conduciendo a un escape de enzimas al citoplasma. La amina acidotrópica, Cloroquina (CQ), es conocida por afectar la acidificación lisosomal e inhibir la autofagia. El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de CQ sobre la distribución de CatD y del CD-MPR en las células tumorales mamarias humanas MCF-7. Cultivos incubados con CQ a diferentes tiempos fueron procesados para inmunofluorescencia indirecta. A las 6h de incubación, el aumento del pH lisosomal impide el reciclaje del CD-MPR al complejo de Golgi. A su vez, este último se encuentra desorganizado y presenta, a todos los tiempos estudiados, el mismo patrón de distribución que el CD-MPR. Sin embargo, CatD presenta un aparente aumento de marcación perinuclear en comparación con células controles. Este efecto podría deberse a que la CatD recién sintetizada espera ser modificada y transportada a compartimentos acídicos. Notoriamente, a las 12 h, la señal perinuclear de CatD desaparece y esta se redistribuye a través de todo el citoplasma, indicando que la misma hubiese sido transportada. A las 18 h, CD-MPR y CatD recuperaron totalmente su localización inicial, denotando que CQ está perdiendo su potencial de acción en el tiempo. En base a esta información preliminar, postulamos que CQ afecta el sistema endo-lisosomal, alterando el transporte normal de CatD, y que su efecto es revertido por mecanismos que aún deben ser elucidados.