IMBECU   20882
INSTITUTO DE MEDICINA Y BIOLOGIA EXPERIMENTAL DE CUYO
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Nadph oxidasa-5 induce estrés oxidativo en las células endoteliales humanas y está regulada positivamente en pacientes con alto riesgo cardiovascular
Autor/es:
DE PAOLA, MATILDE; FLORES, L; CASTRO C; VILLAROEL, O; ESPEJO, N; QUESADA, I; JAQUET,V
Reunión:
Jornada; XXVI Jornadas de Investigación Avances y desafíos de la Ciencias en Pandemia; 2020
Institución organizadora:
SIIP-UNCUYO
Resumen:
La producción excesiva de especies reactivas de oxígeno (EROS) juega un papel perjudicial en la progresión de la aterosclerosis. Se ha planteado la hipótesis de que el aumento de la expresión del sistema de enzimas prooxidantes NADPH oxidasas (NOXs) en la pared arterial se correlaciona con la injuria vascular y la progresión de la placa de ateroma. Si bien varias de las subunidades de NOX han sido bien caracterizadas en modelos de enfermedades cardiovasculares, poco se sabe acerca de la subunidad NOX5. En este estudio nos propusimos determinar la expresión de NOX5 en células endoteliales humanas (HUVEC) en condiciones proaterogénicas y proinflamatorias. Dado que la expresión diferencial de las NOX se produce en condiciones patológicas que incluyen hipertensión arterial e insuficiencia cardíaca, evaluamos también la expresión de NOXs en las arterias mamarias humanas (HMA) de pacientes sometidos a by-pass coronario. Las HUVEC se expusieron a angiotensina II (AngII) o al factor de necrosis tumoral (TNF-alfa) y se incubaron con inhibidores selectivos de NOX una hora antes del tratamiento. La expresión de NOX se determinó mediante qRT-PCR y se evaluó el estrés oxidativo utilizando una sonda fluorescente sensible a la producción de EROS. Las HUVEC expresaron ARNm de NOX2 y NOX5 (2,4 ΔCT ± 0,1 y 19,5 ΔCT ± 1,8, respectivamente). AngII y TNF-alfa aumentaron la generación de EROS en las HUVEC que fue inhibida por la inactivación selectiva de NOX2 o NOX5. Cuando evaluamos la expresión de NOX2 y NOX5 en HMA encontramos una expresión similar a nivel de ARNm (7,42 ΔCT ± 0,55; y 8,32 ΔCT ± 0,43, respectivamente), y una correlación positiva y significativa entre ellas (r = 0,665; p=0,0007). Mediante western blot determinamos la expresión proteica y encontramos una alta expresión de NOX5 en pacientes con hipertensión, dislipidemia y obesidad. Nuestros resultados sugieren que NOX2 y NOX5 se regulan positivamente en condiciones proaterogénicas y contribuyen a la disfunción endotelial. Teniendo en cuenta estos resultados, resulta atractivo especular que moléculas inhibidoras pequeñas, selectivas y específicas de diferentes NOX podrían ejercer un efecto beneficioso sobre la patología vascular