EFECTO CITOPROTECTOR DE LAS ENZIMAS ANTIOXIDANTES GSTA2 Y NQO1 REGULADAS ATRAVÉS DE LA VÍA NRF2-ARE DURANTE LA EVOLUCIÓN DE LA NEFROPATÍA OBSTRUCTIVA NEONATAL

MARTÍN E RINALDI TOSI; VICTORIA BOCANEGRA; WALTER MANUCHA; PATRICIA G. VALLES

Hotel Iruña, Mar del Plata

Congreso; XXXI Reunion Anual Cientifica Consejo Argentino de Hipertensión Arterial; 2010

Sociedad Argentina de Cardiologia

La nefropatía obstructiva congénita es la causa más frecuente de fallo renal en neonatos. El estrés oxidativo y la isquemia producida contribuyen a la generación de especies reactivas de oxigeno (ROS) que constituyen un estímulo a la injuria renal e inducción de la apoptosis. Un mecanismo por el cual las células pueden adaptarse al estrés oxidativo, es a través de la vía Nrf2-ARE, encargada de la regulación positiva de genes antioxidantes responsables de amortiguar las ROS. En este trabajo, evaluamos la activación de la vía Nrf2-ARE, directamente mediante la expresión nuclear del Nrf2 y citosólica de su inhibidor Keap1, por estudios de Western blot; e indirectamente a través de las enzimas antioxidantes Glutation-S-transferasa (GSTA2) y NADPH:quinona oxido reductasa (NQO1) por estudios de RT-PCR. Utilizamos un modelo in vivo de obstrucción ureteral unilateral (OUU) neonatal de ratas Wistar de 48hs de vida, separadas en lotes: Control sin obstrucción (n=4) y Experimental (n=6) las cuales fueron sometidas a obstrucción mecánica del uréter izquierdo durante 5, 7, 10 y 14 días. Luego fueron nefrectomizadas y procesadas muestras de corteza de riñones controles (CC), obstruidos (CO) y contralaterales (CCL). Los resultados demostraron: incremento significativo  en la expresión nuclear de Nrf2 CO y CCL vs CC en día 7 (p<0.001) y en día 14 CCL vs CC (p<0.001), esto se correlacionó con  la disminución de la actividad de NADPH Oxidasa, disminución citosólica del inhibidor Keap1 día 7 de CO vs CC (p<0.01) y el aumento significativo en día 14 de CO vs CC (p<0.001). La expresión enzimática por RT-PCR mostró incremento de la actividad de GSTA2 a los 5 y 7 días en CO y CCL vs de CC (p<0.001), esto es consecuente con el incremento de Nrf2 en fracción nuclear a igual tiempo. En el caso de la enzima NQO1 demostramos incremento de esta enzima a los 7 y 10 días en CO; y a 14 días en CCL vs CC (p<0.05) con una paralela disminución de la enzima en CO en día 14 vs CO de día 7 y 10 (p<0.001). Estos resultados sugieren que: tanto GSTA2 como NQO1, poseen activa participación en el balance de estrés oxidativo celular principalmente a día 5 y 7, consecuencia de la patología obstructiva, tanto en CO como en CCL, lo que claramente demuestra la participación de la vía Nrf2-ARE, en los mecanismos compensatorios de restitución del disbalance oxidativo. Se observó que la protección antioxidante se mantiene en CCL al día 14 postobstrucción como mecanismo compensatorio frente al estrés celular sufrido por el riñón contralateral hiperfiltrante.