LA DISPONIBILIDAD DE ÓXIDO NÍTRICO MODULARÍA AL FACTOR TRANSCRIPCIONAL WT-1 EN EL PROCESO DE INDUCCIÓN A LA APOPTOSIS DURANTE LA NEFROPATÍA OBSTRUCTIVA

LUCIANA MAZZEI; VALERIA CACCIAMANI; MARÍA EUGENIA BENARDÓN; ISABEL MERCEDES GARCÍA; ANDREA GIL; CARLOS MARTÍN APPIOLAZA; WALTER MANUCHA

Hotel Iruña, Mar del Plata, Bs. As.

Congreso; XXX Reunión del Consejo Argentino de Hipertensión Arterial; 2009

Sociedad Argentina de Cardiología y Consejo Argentino de Hipertensión Arterial

El normal desarrollo renal requiere la conversión de células del mesénquima mesodérmico en células epiteliales polarizadas, proceso modulado por WT-1 (regulador transcripcional en proliferación y diferenciación celular). Alteraciones del mismo han sido asociadas a tumores, desórdenes metabólicos, inmunitarios, hipertensión y obstrucción renal. WT-1 se encontraría disminuido durante la nefropatía obstructiva lo que favorece la apoptosis por disminución de genes dependientes relacionados a inhibición de la misma. Además, ha sido descripta una interacción funcional con el gen promotor de la principal fuente productora de óxido nítrico. Al respecto, nuestro laboratorio comunicó que el óxido nítrico induce citoprotección del tubulointersticio durante la nefropatía obstructiva neonatal. Objetivos: evaluar la probable interacción óxido nítrico y el factor de transcripción WT-1 en el proceso de inducción a la apoptosis durante el desarrollo de la nefropatía obstructiva. Método: A)- Ratas Wistar neonatas (n=5), obstruidas o no (CO o CC) a nivel de la unión ureteropélvica (con o sin tratamiento de Rosuvastatina (CR y OR) 10mg/Kg/día y/o L-NAME/nitroprusiato de sodio) nefrectomizadas después de 14 días a fin de evaluar en corteza renal: Apoptosis (TUNEL, expresión RT-PCR e inmunohistoquímica de Bax/BcL2), niveles de óxido nítrico (Griess), expresión WT-1 (RT-PCR), ERK, fosfoERK y p38 (WB). B)- Cultivo celular (MDCK) tratadas con L-NAME, L-Arginina y nitroprusiato de sodio (1mM); para determinar niveles de óxido nítrico, expresión WT-1 (RT-PCR) y ERK, fosfoERK y p38 (WB). Resultados: El tratamiento con R así como la mayor disponibilidad de óxido nítrico disminuyó la apoptosis inducida en CO (p<0.01). Verificamos aumento en la expresión de WT-1 (p<0.05) en concordancia con una sensible disminución de la apoptosis. Los ensayos en células renales cultivadas (MDCK) confirmaron que la disponibilidad de óxido nítrico se asocia a la expresión de WT-1 lo que condiciona a ERK y p38 en la señalización moduladora de apoptosis. Conclusiones: Los resultados del presente trabajo nos permiten sugerir un novedoso mecanismo de retroalimentación positiva del óxido nítrico sobre la expresión de WT-1 lo cual establecería un fino control en el desarrollo de la apoptosis renal por obstrucción. La fosforilación de WT-1 y su relación con mediadores génicos relacionados, podría ser uno de los mecanismos regulados por el óxido nítrico en la inducción a la muerte celular.