PARTICIPACIÓN DE LA CHAPERONA Hsp70 EN EL EFECTO CITOPROTECTOR DE LOSARTAN SOBRE LA MODULACIÓN DEL CITOESQUELETO Y LA MIGRACIÓN EN CÉLULAS EPITELIALES RENALES DE TÚBULOS PROXIMALES

COSTANTINO V.V.; BOCANEGRA V; CACCIAMANI V; COSTANTINO V.V.; BENARDON M.E.; BOCANEGRA V; CACCIAMANI V; GIL LORENZO A.F.; BENARDON M.E.; VALLES PG; GIL LORENZO A.F.; VALLES PG

Buenos Aires

Congreso; 7° Congreso Argentino de Nefrología Pediátrica; 2018

Sociedad Argentina de Pediatría

PARTICIPACIÓN DE LA CHAPERONA Hsp70 EN EL EFECTO CITOPROTECTOR DE LOSARTAN SOBRE LA MODULACIÓN DEL CITOESQUELETO Y LA MIGRACIÓN EN CÉLULAS EPITELIALES RENALES DE TÚBULOS PROXIMALESEl incremento de Angiotensina II (AII) y consecuente generación de estrés oxidativo son factores implicados en la progresión de la injuria renal relacionada con la hipertensión que, en las células tubulares inducen desorganización del citoesqueleto, pérdida de la polaridad y acumulación de miofibroblastos a través de la transición epitelio mesénquima. Uno de los mecanismos de protección de las células contra la acción de las ROS incluye la producción de proteínas de choque térmico (Hsp), que ayudan a mantener y restaurar la función normal de las células frente a un estrés. Nosotros hemos demostrado que Losartan (Los) reduce el estrés oxidativo en células de túbulos proximales de ratas espontaneamente hipertensas (PTC SHR) mediante la degradación proteosómica de Nox4 y esto es mediado por Hsp70/CHIP. En este trabajo el objetivo fue evaluar el rol de Hsp70 como chaperona moduladora del efecto renoprotector del Los en la migración y estabilización del citoesqueleto de PTC SHR. Para ello, cultivos primarios de PTC de ratas SHR y WKY fueron estimuladas con AII o tratadas con Los o no tratadas (C). Mediante Live Cell Time-lapse Microscopy, observamos que Los induce disminución del desplazamiento y la velocidad de movimiento celular comparadas con SHR PTC C y AII. Cuando la expresión de Hsp72 fue silenciada mediante transfección con el vector plasmídico shHsp72-pSIREN-RetroQ, la velocidad y el desplazamiento mostraron valores similares a SHR C. Por inmunofluorescencia demostramos que PTC SHR Los muestran filamentos de actina altamente organizados y un aumento de la actina cortical. Cuando se silenció la expresión de Hsp72, Los no pudo estabilizar el citoesqueleto mostrando filamentos de actina desalineados. El análisis por Western Blot reveló que Los induce disminución de la fosforilación de ERK y p38, aumento de E-cadherina y vinculina y reducción de α-actina. Estos resultados nos permiten inferir que Los reduce la migración celular e induce la estabilización del citoesqueleto de actina y de las uniones intercelulares siendo estos efectos modulados por Hsp72.