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Introducción:Los esteroides sintetizados y metabolizados en el sistemanervioso central (SNC) se denominan neuroesteroides. Estas moléculas poseen un alto potencial deuso farmacológico aún en estudio. Participan de la regulación endócrina de lamodulación del síndrome pre menstrual, post menopáusico y en enfermedadesneurodegenerativas. En este caso en particular, abordamos el efecto potencialsobre la fertilidad y diversos aspectos de la biología reproductiva de lahembra. Allopregnenolona (ALLO) es un neuroesteroide y elprincipal metabolito activo de progesterona. Presenta múltiples propiedades anivel del SNC tales como la reducción de la ansiedad, la potenciación de lamemoria y el aprendizaje, así como efectos neuroprotectores. Su concentraciónvaría durante el ciclo estral, la preñez y en situaciones de estrés. Previamente probamos que ALLO, icv en dosis farmacológica(6µM) ejerce efectos sobre diversos parámetros reproductivos. Produjo una inhibiciónde la secreción de hormona luteinizante (LH), la ovulación y la receptividadsexual, además, indujo un aumento de los niveles de Pg y prolactina sérica. Anivel central se conoce que ejerce sus efectos a través del receptor GABA, peroen el ovario aún se desconocen los mecanismos. Hipotetizamos que el efecto de ALLO podría extendersehacia la morfo-fisiología ovárica. Determinamos, entonces, con la misma dosislos efectos de ALLO i.c.v. sobre el proceso de regresión lútea, laconcentración de Pg ovárica y sérica, el proceso de apoptosis en folículos y lamorfometría de las distintas estructuras ováricas junto con la evaluación de laproliferación celular en folículos ováricos, y angiogénesis en cuerpos lúteos. Objetivos:1. Evaluar el efecto dela administración de ALLO intrabursa a las 24 y 120 h (2 estros consecutivos)sobre los procesos de muerte celular programada (apoptosis), formación denuevos vasos sanguíneos (angiogénesis) y sobre la morfo-fisiología ovárica dela rata adulta en ciclo. 2. Determinar medianteuna curva dosis/respuesta la dosis efectiva en este modelo experimental. Metodología:Animales de experimentación: Ratas hembrasadultas vírgenes de la cepa Sprague Dawley (Rattus norveguicus) de 60 días deedad, con un peso de 250 ? 300g, nacidas y criadas en el bioterio central deIMBECU. Serán mantenidas en condiciones controladas de temperatura (21±2°C) eiluminación (12 hs luz/12 hs oscuridad), con libre acceso a alimento (alimentobalanceado Cargill, Córdoba, Argentina) y agua. Todos los experimentosrealizados en este trabajo seguirán las pautas para cuidado y uso de animalesde laboratorio provistas por el CICUAL (entidad que aprobó previamente nuestroprotocolo experimental N° 141021/2015), Universidad Nacional de Cuyo, Mendoza,Argentina.Diseño Experimental: En la mañana del proestro se procederáa la administración intrabursa del neuroesteroide en un volumen de 5µl/ovario en el ovario izquierdo y vehículo en el derechomediante una jeringa Hamilton ultradelgada. Los animales serán anestesiadossegún protocolos de rutina (Ketamina 90 mg/kg + Xilazina 10 mg/kg i.p.).Luego del sacrificio, se colectará la sangre troncal, seextraerán ambos ovarios y se verificará la ovulación mediante punción en laámpula y recuento de los ovocitos. Luego se limpiarán los ovarios y se fijaránen solución de Bouin para el posterior procesamiento histológico einmunohistoquimico.Análisis Histológico: teñidos con hematoxilina-eosina,recuento y medición del diámetro de estructuras. Verificación de la ovulaciónpost tratamiento y volumen ovárico.Estudios Inmunohistoquímicos: identificación de factorespro y anti-angiogénicos específicos (α-actina y Von Willebrand) y de factorespro y anti apoptóticos (Caspasa 3 clivada y BCL2, BAX) y el factor deproliferación PCNA. Estudios Endócrinos: Radioinmunoanálisis de suero tronalpara la determinación de estrógeno y progesteronaEstudios de actividad enzimática en tejido ovárico 3β-HSDy la 20α-HSD Estudios de funcionalidad: mediante la administraciónconcomitante de Bicuculina (antagonista GABAA).Medición de Allo por GC-Ms/Ms en suero.