Antigenicidad e inmunogenicidad de antígenos vacunales de primera generación de Leishmania amazonensis

CARGNELUTTI D.E.; MERA Y SIERRA R; GERMANÓ, M.J.; MACKERN-OBERTI, J.P.; CARRIZO L; CALATAYUD L.E.; SALOMÓN M.C.

Santiano

Congreso; XXIV Congreso Latinoamericano de Parasitología (FLAP XXIV); 2017

Federación Latinoamericana de Parasitología

Introducción: La leishmaniasis es un grupo de enfermedades causadas por parásitos intracelulares del género Leishmania. Una estrategia para la prevención de la misma sería el uso de vacunas, las cuales, en función delantígeno utilizado se clasifican en vacunas de primera, segunda y tercera generación. Las primeras se basan en la utilización de todo el microorganismo y emplean diversas metodologías para la obtención de Antígenos Totales de Leishmania (ATL): autoclavado, congelamiento/descongelamiento, pasteurización y sonicación de promastigotes. Hasta el momento, no existen antecedentes que comparen el perfil antigénico e inmunológico dado por cada una de las metodologías empleadas. Objetivo: Evaluar el perfil antigénico y la respuestainmune generada por los ATL de L. amazonensis obtenidos por las metodologías anteriormente mencionadas. Metodología: Los ATL fueron obtenidos mediante: autoclavado (1atm, 121°C) -ATLa-, congelamiento (-80°C) / descongelamiento (56°C) -ATLc-, pasteurización (1hr 56°C) -ATLp- y sonicación (1min 40W, enfrío) -ATLs-. El perfil antigénico de los mismos fue comparado con promastigotes de L. amazonensis en un gel de poliacrilamida. Para evaluar la inmunogenicidad se vacunaron ratones BALB/c con 100µg de cada uno de los antígenos. Además, se inmunizaron ratones BALB/c con PBS, ATLs y ATLs formulado con Poly (I:C)como adyuvante. Se evaluó la respuesta inmune humoral, mediante la determinación de anticuerpos IgG, IgG1 e IgG2a, y la respuesta celular, evaluando la producción de citoquinas del perfil Th1/Th2 y el test de hipersensibilidad retardada (DTH). Resultados: Se observó que los ATLs mantuvieron un perfil proteico similar al cultivo de promastigotes. Los mismos generaron elevados niveles de anticuerpos del tipo IgG, IgG1 e IgG2a, y fueron capaces de generar un aumento en la producción de IFN-gy bajos niveles de IL-4 e IL-10.Al formular los ATLs con Poly (I:C), la respuesta inmune se revirtió hacia un perfil Th1. Esta formulación generó un aumento en la DTH. Conclusión: La metodología empleada en la obtención de antígenos vacunales de primera generación influye en el perfil antigénico y la respuesta inmune en ratones BALB/c. Los ATLs, generan un perfil antigénico similar a los promastigotes de L. amazonensis, con una fuerte respuesta inmune humoral y celular. La formulación de ATLs con Poly (I:C) revierte la respuesta hacia un perfil Th1.