Expresión de las proteínas HSP27 y HSP70 en líneas celulares de adenocarcinoma colorectal deficientes y no deficientes en hMLH1.

SILVINA B. NADIN, F. DARÍO CUELLO CARRIÓN, DANIEL R. CIOCCA Y LAURA M. VARGAS ROIG

Mar del Plata, Argentina

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2009

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Diversos trabajos han mostrado los efectos celulares de la hipertermia. Sin embargo, sus consecuencias no han sido estudiadas en células tumorales deficientes y no deficientes en hMLH1. La proteína hMLH1 es uno de los componentes del sistema de reparación de mal apareamiento de bases (Mismatch Repair: MMR). Tanto el sistema MMR como las proteínas de golpe de calor (HSPs) se relacionan con la resistencia a drogas antineoplásicas. En este trabajo, determinamos la expresión de HSP27 y HSP70 en las líneas celulares de adenocarcinoma colorectal humano HCT116 (hMLH1-deficiente, parental), HCT116+ch3 (hMLH1-no deficiente, complementada con el cromosoma 3), y HCT116+ch2 (control, complementada con el cromosoma 2). Las células fueron incubadas durante 1 hora a 41 y 42°C, un grupo fue recolectado inmediatamente luego del tratamiento térmico (tiempo 0, T0), y los otros grupos se dejaron recuperar a 37°C durante 4 y 24 hs (T4 y T24 respectivamente). Se evaluó la expresión de HSP27 y HSP70 por inmunocitoquímica y Western blot y el daño al ADN con alkaline comet assay. Luego del golpe de calor, observamos mayor expresión de HSP27 y HSP70 en la línea celular HCT116+ch3, en comparación con las líneas celulares deficientes en hMLH1. Se observó elevada acumulación nuclear de HSP70 en las células HCT116+ch3 luego del golpe de calor a 41 y