Vacuna formulada con la nucleoproteína viral recombinante y el adyuvante c-di-amp, administrada por vía subcutánea a ratones, protege frente a la infección con distintos subtipos de influenza

SANCHEZ MV; EBENSEN T; SCHULZE K; CARGNELUTTI D; IBAÑEZ LI; CALDEVILLA C; SCODELLER E; GUZMÁN C

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; XII Congreso Argentino de Virología; 2017

Sociedad Argentina de Virología

La gripe es una enfermedad respiratoria producida por el virus de influenza,con un alto impacto anual en términos de morbilidad y mortalidad. Las vacunasantigripales utilizadas actualmente se basan en la inducción de respuestashumorales, anticuerpos frente a las proteínas de superficie virales altamentecambiantes, que no son totalmente capaces de proteger contra nuevas variantesantigénicas y nuevos virus emergentes. La formulación de vacunas incluyendoantígenos conservados virales y nuevos adyuvantes capaces de inducir fuertes respuestascelulares, puede ser una valiosa estrategia para el desarrollo de una vacunauniversal.En este estudio, se evaluó la eficacia de una vacuna formulada con la nucleoproteínaviral recombinante (NPr) combinada con el adyuvante agonista de STING,bis-(3',5')-adenosina monofosfato cíclico (c-di-AMP), administrados por víasubcutánea en ratones. Grupos de ratones BALB /c fueron inmunizados en los días1 y 21 con solución salina, NPr sola, y NPr+c-di-AMP. En el día 42, lasrespuestas inmunes humorales y celulares fueron evaluadas. La respuesta inmune humoralantígeno específica fue evaluada en suero por medición del título deanticuerpos IgG total e IgG subtipos, por ELISA. La respuesta inmune celularfue evaluada en cultivo de esplenocitos de los ratones inmunizados, luego de lare-estimulación antígeno específica. Para la evaluación de los perfilesinmunológicos inducidos por la vacunación se realizó: ELISPOT para lacuantificación de las células productoras de IFN-γ, IL-2 (perfil Th1) e IL-4(perfil Th2); citometría de flujo para evaluar los linfocitos T productores decitoquinas intracelulares IL-2, TNF-α, IFN-γ, IL-4. En el día 50 se realizó unensayo de citoxicidad in vivo con CFSE. En el día 60, los grupos inmunizadosfueron desafiados con virus de influenza A/PuertoRico/8/34 (H1N1) y A/HongKong/1/68 (H3N2). Luego de la infección, se controló la pérdida de peso de losanimales durante 2 semanas.La formulación NPr+c-di-AMP, confirió una eficaz protección a ratones desafiadoscon dosis letales de los subtipos de influenza H1N1 y H3N2, comparada con laNPr sin adyuvante. La protección se correlacionó con altos títulos deanticuerpos antígeno específicos, IgG total (4x105) e IgG subtipos, IgG1(8,9x105) e IgG2a (4,8x105), comparadas con la inmunización con la NPr sola,con títulos de IgG (1,8x105), IgG1 (3,6x105) e IgG2a (1,84x104). La formulaciónNPr+c-di-AMP indujo una respuesta fundamentalmente del tipo Th1, evidenciadapor una alta presencia de células productoras principalmente de IFN-γ e IL-2, ycorroborada por alta frecuencia de células T CD4+ productoras de IL-2, TNF-α, eIFN-γ. Además, la formulación NPr+c-di-AMP indujo fuertes respuestas citotóxicasin vivo, evidenciada por la lisis significativa de células presentadoras deantígeno (CD19 y CD11c). Este estudio demostró que el uso del nuevo adyuvantec-di-AMP, puede aportar una ventaja significativa en el desarrollo de unavacuna universal.