Identificación de componentes solubles en explantes de tejido adiposo humano proveniente de mamas normales y tumorales

FLETCHER SJ; HAPON MB; CALLEGARI E; SERRA MF; LOPEZ-FONTANA CM; SASSO CV; SANTIANO FE; CALVO JC; CARÓN RW; PISTONE-CREYDT V

CABA

Jornada; XXX Jornadas Nacionales de Oncología del Instituto ?ÁNGEL H. ROFFO?; 2015

Además delos cambios epigenéticos y genéticos que ocurren en las células epiteliales, seha demostrado que la progresión de un tumor depende también del diálogobidireccional entre las células epiteliales tumorales y las células estromalescircundantes. En la mama, el tejido adiposo es el tipo estromal predominante. Demostramosrecientemente que los medios condicionados (MCs) de explantes de tejido adiposohumano de mamas tumorales (EATh) regulan la proliferación, adhesión y migraciónde líneas celulares epiteliales tumorales mamarias; a diferencia de los MCs deexplantes de tejido adiposo de mamas normales (EANh). En este trabajocomenzamos a identificar componentes solubles presentes en los diferentes MCsutilizando un enfoque proteómico. Para ello, separamos las proteínas presentesen los MCs en geles de poliacrilamida de gran tamaño (30 x 30 cm, 150microlitros/calle). Además, liofilizamos alícuotas de los diferentes MCs y,utilizando two-dimensional nano-liquidchromatography (2D-nanoLC)-mass spectrometry (MS/MS), comenzamos aidentificar las proteínas a partir de muestras complejas (shotgun proteomics). Finalmente, analizamos los datos obtenidosutilizando el programa ProteoIQ (Premier Biosoft), el cual provee normalizacióny análisis estadístico entre replicados y muestras respectivamente. Observamosque los MCs-EATh presentaron una mayor diversidad de proteínas (a igualconcentración de proteínas totales), y una mayor cantidad de proteínas (a igualvolumen final), que los MCs-EANh (p˂0.05). Además, encontramos que laapolipoproteína A-1 (involucrada en procesos metabólicos lipídicos); el factorde complemento C3 (involucrado en la transducción de señales); y la vimentina (glicoproteínapresente en células de origen mesenquimal y recientemente relacionada con unfenotipo invasivo en breast cáncer); se expresaban significativamente  más en los MCs-EATh vs. MCs-EANh (p˂0.05). Los factores podrían estar involucrados enlos efectos biológicos observados. Identificar estos factores en tejido adiposoy estudiar la participación de los mismos en la regulación de la progresióntumoral podrían proporcionar nuevas estrategias para prevenir y/o tratar elcáncer de mama.