IMBECU   20882
INSTITUTO DE MEDICINA Y BIOLOGIA EXPERIMENTAL DE CUYO
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Metilación y expresión de TP73 en carcinomas de mama
Autor/es:
NADIN SB; GOMEZ LC; SOTTILE M; MARZESE DM; FLAMINI MI; GAGO F; OROZCO J; TELLO O; ROQUÉ M; VARGAS-ROIG LM
Lugar:
Mendoza
Reunión:
Jornada; XIII Jornadas de Investigación de la Facultad de Ciencias Médicas, UNCuyo; 2014
Resumen:
El cáncer de mama es una enfermedad de elevada incidencia en nuestro país. Para decidir el mejor tratamiento, actualmente se consideran factores pronósticos histológicos y proteómicos. Sin embargo, en múltiples ocasiones la terapia resulta inadecuada (por exceso o defecto), por lo que sigue siendo necesario identificar nuevos factores que permitan optimizar el diagnóstico de la enfermedad precisando su agresividad biológica y de esa manera determinar el pronóstico de la enfermedad y el tratamiento adecuado. Desde hace algunos años estamos abocados al estudio del perfil de metilación aberrante de carcinomas mamarios. Los resultados obtenidos sugieren que este perfil es específico y exclusivo de tejidos tumorales malignos y que existe similitud entre el perfil de metilación aberrante del tumor y el perfil del ganglio linfático. Se ha observado que los tumores triple negativos (que no expresan receptor de estrógenos, receptor de progesterona ni HER-2) tienen un perfil específico definido por la metilación de 5 genes (entre los que se encuentra p73) y la no metilación de 11 genes. También hemos reportado que la metilación aberrante del gen p73 (en la región +258 pb) en carcinomas ductales infiltrantes correlacionó con alto grado histológico que es uno de los principales marcadores de mal pronóstico. Es por esto que el objetivo de este trabajo fue: Determinar si la metilación del gen TP73 en carcinomas mamarios se relaciona con su expresión proteica. Hasta la fecha se incorporaron en el estudio los tumores de 23 pacientes con cáncer de mama. Estas pacientes corresponden a un grupo de 69 pacientes inicialmente estudiadas en el protocolo ?Estudio del silenciamiento epigenético de genes supresores tumorales en cáncer de mama?. La metilación del gen TP73 en estas muestras ha sido reportada previamente. Las muestras se incubaron con el anticuerpo primario anti-p73 (Abcam) durante toda la noche a 4°C y luego con el segundo anticuerpo anti-conejo y el complejo avidina-biotina peroxidasa (Elite Vectastain ABC kit, Vector). La inmunotinción se evaluó según intensidad y proporción utilizando el siguiente puntaje: a) intensidad: sin tinción 0, tinción débil 1, tinción moderada 2 y tinción fuerte 3; y b) proporción: 66% = 4. Se consideró positiva la expresión cuando el puntaje total fue ≥3. Se utilizó test de Fisher para evaluar la relación entre la metilación del gen TP73 y la expresión de la proteína p73 (programa GraphPad Prism 5). En los 3 casos donde no se expresó la proteína p73 en las células tumorales, el gen TP73 (+258) estaba metilado. Sin embargo, en el 67% de los casos, la metilación de una o de las dos regiones estudiadas no se relacionó con la ausencia o disminución de la expresión proteica. La falta de correlación entre los resultados obtenidos (metilación y expresión del gen) puede deberse, en parte a la heterogeneidad del tumor, recordando que los estudios genómicos y proteómicos se realizaron en dos muestras distintas tomadas de la misma región tumoral y al bajo número de casos analizados.