IMBECU   20882
INSTITUTO DE MEDICINA Y BIOLOGIA EXPERIMENTAL DE CUYO
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
MLH1 Y MSH2 INTERACTÚAN CON HSP27 Y HSP72 EN CÉLULAS TUMORALES DE COLON HUMANO EXPUESTAS A HIPERTERMIA Y CISPLATINO
Autor/es:
SOTTILE M; LOSINNO A; FANELLI M.A.; CUELLO-CARRIÓN; CIOCCA D.R.; VARGASLM; NADIN S.;
Reunión:
Congreso; Congreso; LVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC), Reunión de la Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS),XLV Reunión de la Sociedad Argentina de Farmacología Experimental (SAFE);; 2013
Resumen:
En los últimos años se ha reportado la vinculación entre
proteínas de golpe de calor (HSPs) y componentes de diversos
sistemas de reparación del ADN, como por ejemplo BER y NER;
habiéndose observado que las HSPs pueden asistir a estos
mecanismos en la corrección de daños. Hemos reportado la
colocalización entre las proteínas hMLH1 y hMSH2 con HSP27
y HSP72 en linfocitos humanos de sangre periFerica. hMLH1 y
hMSH2, integrantes del sistema ?Mismatch Repair? (MMR), son
esenciales en el reconocimiento del daño causado por cisplatino
(CPt). El propósito de este trabajo consistió en corroborar la interacción
entre hMLH1, hMSH2, HSP27 y HSP72 en células de
adenocarcinoma de colon humano, deficientes y no deficientes
en el sistema MMR, expuestas a hipertermia (H) y/o CPt. Las
líneas celulares HCT116 y HCT116+ch2 (hMLH1 deficientes) y
HCT116+ch3 fueron expuestas a: 1- CPt, 10 µM (1 h). 2- H+CPt,
CPt 10 µM (1 h) 24 hs después de un tratamiento térmico a 42°C
(1 h). Las células fueron fijadas a las 0, 2, 4 y 24 hs después del
CPt para estudios de inmunofluorescencia confocal. Para inmunoprecipitación
cruzada se utilizaron muestras control, tratadas
con CPt e H+CPt cosechadas 24 hs post-CPt. El coeficiente de
colocalización (Pearson) entre hMLH1 y HSP72 y los coeficientes
de Manders, en la línea HCT116+ch3 expuesta a H+CPt, aumentaron
significativamente en relación al control a las 24 hs del CPt
(P= 0,0153 y P= 0,03, respectivamente). También se verificó
colocalización entre: hMLH1-HSP27, hMSH2-HSP27 y hMSH2-
HSP72 (Pearson>0,5). Mediante inmunoprecipitación observamos
interacciones directas entre: hMLH1-HSP27, hMLH1-HSP72,
hMSH2-HSP27 y hMSH2-HSP72. Nuestro trabajo demuestra por
primera vez la interacción entre componentes del sistema MMR
y las proteínas HSP27 y HSP72. Estas HSPs podrían colaborar
con el sistema MMR en la reparación de los daños inducidos por
cisplatino. Este hallazgo constituye el punto de partida para futuros
estudios funcionales.