Estudio de la neovacularización de las placas de ateroma en arterias de ratones deficientes de apolipoproteína E

LOPEZ MT; CERIONI S; REDONDO A; CANNIZZO B; CRUZADO M; CASTRO C

mendoza

Jornada; Reunión conjunta del III Foro Provincial de Investigación para la Salud, del Ministerio de Salud de la Provincia de Mendoza, las XII Jornadas de Investigación de la Facultad de Ciencias Médicas; 2012

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CUYO

La presencia de factores de riesgo cardiovascular como hipercolesterolemia, hipertensión arterial, diabetes mellitus, representan un estímulo aterogénico sobre la pared arterial, que inicia diversos procesos relacionados con la disfunción endotelial y la respuesta inflamatoria. Un aspecto relevante en las fases iniciales de la aterosclerosis es la respuesta de la Vasa Vasorum (VV) de la adventicia arterial. La presencia de VV es un hecho fisiológico y tiene como principal objetivo aportar nutrientes, especialmente sangre oxigenada, a aquellas regiones de la pared arterial que no pueden nutrirse a través de la luz arterial. Además la presencia de VV en la adventicia supone un mecanismo de defensa de la arteria ante ciertas injurias, como puede representar la angioplastia. A partir de estudios anatomo-patológicos post-mortem, se sabe que incluso en las lesiones iniciales de la aterosclerosis (engrosamiento de la intima, lesión tipo 1 según la clasificación de la American Heart Association), ya existe un incremento de VV en la adventicia de aquellos sujetos con un evento cardiovascular, respecto a aquellos asintomáticos. La hiperplasia de la VV en la pared arterial es un signo precoz de la aterosclerosis, mientras que la infiltración de la pared arterial por parte de macrófagos constituye una fase más avanzada de la enfermedad. Uno de los estímulos relacionados con el desarrollo de la placa de ateroma y la neovascularización de la pared arterial, es la presencia de células progenitoras endoteliales derivadas de médula ósea (EPC) que contribuirían a la neovascularización en las dos condiciones fisiológicas y patológicas. Las EPC fueron identificadas originalmente como células CD34+/ FLK-1+ /Sca-1+, se diferencian a un fenotipo endotelial expresando marcadores endoteliales y se incorporan a neovasos en los sitios de isquemia. Además liberan citoquinas pro-angiogénicas y contribuyen a la iniciación de la neoangiogénesis. Las poblaciones de EPC pueden ser responsables de encender el "interruptor angiogénico", por lo tanto el estudio de la VV en las fases iniciales del desarrollo de la placa de ateroma puede representar un gran avance en el conocimiento de la fisiopatología de la aterosclerosis y a la identificación de futuras dianas terapéuticas. A partir de estudios anatomo-patológicos post-mortem, se sabe que incluso en las lesiones iniciales de la aterosclerosis (engrosamiento de la intima, lesión tipo 1 según la clasificación de la American Heart Association), ya existe un incremento de VV en la adventicia de aquellos sujetos con un evento cardiovascular, respecto a aquellos asintomáticos. La hiperplasia de la VV en la pared arterial es un signo precoz de la aterosclerosis, mientras que la infiltración de la pared arterial por parte de macrófagos constituye una fase más avanzada de la enfermedad. Uno de los estímulos relacionados con el desarrollo de la placa de ateroma y la neovascularización de la pared arterial, es la presencia de células progenitoras endoteliales derivadas de médula ósea (EPC) que contribuirían a la neovascularización en las dos condiciones fisiológicas y patológicas. Las EPC fueron identificadas originalmente como células CD34+/ FLK-1+ /Sca-1+, se diferencian a un fenotipo endotelial expresando marcadores endoteliales y se incorporan a neovasos en los sitios de isquemia. Además liberan citoquinas pro-angiogénicas y contribuyen a la iniciación de la neoangiogénesis. Las poblaciones de EPC pueden ser responsables de encender el "interruptor angiogénico", por lo tanto el estudio de la VV en las fases iniciales del desarrollo de la placa de ateroma puede representar un gran avance en el conocimiento de la fisiopatología de la aterosclerosis y a la identificación de futuras dianas terapéuticas. A partir de estudios anatomo-patológicos post-mortem, se sabe que incluso en las lesiones iniciales de la aterosclerosis (engrosamiento de la intima, lesión tipo 1 según la clasificación de la American Heart Association), ya existe un incremento de VV en la adventicia de aquellos sujetos con un evento cardiovascular, respecto a aquellos asintomáticos. La hiperplasia de la VV en la pared arterial es un signo precoz de la aterosclerosis, mientras que la infiltración de la pared arterial por parte de macrófagos constituye una fase más avanzada de la enfermedad. Uno de los estímulos relacionados con el desarrollo de la placa de ateroma y la neovascularización de la pared arterial, es la presencia de células progenitoras endoteliales derivadas de médula ósea (EPC) que contribuirían a la neovascularización en las dos condiciones fisiológicas y patológicas. Las EPC fueron identificadas originalmente como células CD34+/ FLK-1+ /Sca-1+, se diferencian a un fenotipo endotelial expresando marcadores endoteliales y se incorporan a neovasos en los sitios de isquemia. Además liberan citoquinas pro-angiogénicas y contribuyen a la iniciación de la neoangiogénesis. Las poblaciones de EPC pueden ser responsables de encender el "interruptor angiogénico", por lo tanto el estudio de la VV en las fases iniciales del desarrollo de la placa de ateroma puede representar un gran avance en el conocimiento de la fisiopatología de la aterosclerosis y a la identificación de futuras dianas terapéuticas. HIPÓTESIS La presencia de precursores vasculares asociada al aumento de la expresión del factor inducible por hipoxia, constituye un signo precoz de neovascularización intra-placa, aumentando la posibilidad de ruptura y desencadenamiento de un evento cardiovascular. OBJETIVOS Nos propusimos (I) Identificar células progenitoras endoteliales (EPC) en la pared vascular durante el desarrollo de las placas de ateroma. (II) Cuantificar factores angiogénicos, como el Factor Inducibe por Hipoxia (HIF) y el factor de crecimiento vascular (VEGF) durante la aterogénesis. Modelo Experimental Se utilizaron ratones de la cepa ApoE-KO y la cepa control (ratón C57/BL6). Se desarrolló el modelo experimental de aterosclerosis por administración de dieta aterogénica (D-ATG), alimento para ratón con agregado de colesterol 1.25% (p/p) y grasa 20% (p/p) (Gepsa, Argentina). En el grupo control los animales se trataron con comida estándar que contiene colesterol 0.09% (p/p) y grasa 3,9% (p/p). La dieta fue administrada durante 30 días. Los experimentos se realizaron de acuerdo a lineamientos institucionales para experimentación en animales, aprobados por el CICUAL-FCM-UNCuyo