Efectos de la hipertermia en la expresion genica de proteinas de golpe de calor en celulas tumorales deficientes en hMLH1

MAYRA L. SOTTILE; DANIEL R. CIOCCA; LM VARGAS ROIG; SILVINA B. NADIN

San Juan

Congreso; 2da Reunion Conjunta de Sociedades de Biologia de la Republica Argentina; 2011

La exposición transitoria a una hipertermia moderada (39-42°C) induce la síntesis de proteínas de golpe de calor (HSPs). Diversas líneas celulares expresan en forma constitutiva HSP27 y HSP72, las cuales, actuando como chaperonas moleculares, son críticas para la proliferación y supervivencia celular, pueden participar en la reparación del ADN y se han asociado con resistencia a drogas antineoplásicas. Sin embargo, se desconoce aún si las HSPs están vinculadas con el sistema de reparación mismatch repair (MMR). Objetivo: Analizar la expresión a nivel de ARNm de HSP27, HSP72, HSF1, hMLH1 y hMSH2 en líneas celulares de adenocarcinoma colorectal deficientes y no deficientes en sistema MMR (hMLH1). Métodos: Las líneas celulares HCT116 y HCT116+ch2 (MMR incompetente) y la línea HCT116+ch3 (MMR competente) fueron expuestas a una hipertermia moderada (41 y 42°C, 1 hora), un grupo fue recolectado inmediatamente después del golpe de calor, y los otros grupos se dejaron recuperar a 37°C  durante 4 y 24 horas. Se utilizó la t¨¦cnica RT-PCR en tiempo real, utilizando beta-actina como gen normalizador. Resultados: La expresión constitutiva a nivel de ARNm de HSP27 y HSP72 en la línea HCT116+ch3 fue superior que en la HCT116. Bajo los efectos de la hipertermia, la transcripción de HSP27,  HSP72 y HSF1 aumentó significativamente en todas las líneas celulares, pero los niveles de expresión fueron superiores en la línea HCT116+ch3. La expresión de hMLH1 en la línea HCT116+ch3 aumentó en forma significativa luego del tratamiento térmico (P<0,001). Un comportamiento similar se observó con hMSH2 (P< 0,001). Conclusiones: Nuestros resultados sugieren que la expresión de los genes HSP27, HSP72 y HSF1 se modifica en presencia de un sistema MMR deficiente. El incremento en la expresión de hMLH1 y hMSH2 en la línea HCT116+ch3, luego de una hipertermia moderada, sugiere que el sistema MMR podría intervenir en la respuesta al estrés térmico y que HSF1 podría modular la actividad de este sistema.