Los niveles de células progenitoras endoteliales se ven afectados por la disfunción endotelial asociada al sindrome metabólico

LEMBO, C; RENNA NF; DIEZ E; LAMA C; GONZALEZ S; MIATELLO RM

Buenos Aires

Congreso; XVII Congreso Argentino de Hipertensión Arterial; 2010

Sociedad Argentina de Hipertension Arterial

Objetivo: Estudiar la participación de las células progenitoras endoteliales (CPE) en los procesos de reparación vascular asociados a la disfunción endotelial (DE) presente en un modelo experimental de síndrome metabólico (SM) generado por la administración crónica de fructosa a ratas espontáneamente hipertensas. Material  y métodos: Ratas Wistar Kyoto (WKY) y espontáneamente hipertensas (SHR), macho, de 30 días se distribuyeron aleatoriamente en 4 grupos (n=8 c/u): WKY: controles; FFR: WKY recibiendo fructosa en agua de bebida al 10 % (v/v) durante 8 semanas; SHR; FFHR: SHR recibiendo fructosa en agua de bebida al 10 % (v/v) durante 8 semanas. Al finalizar el protocolo se determinó: presión arterial sistólica por el método pletismográfico en la arteria de la cola. Variables metabólicas: glucemia basal y prueba de tolerancia oral, triglicéridos y colesterol HDL. Determinación del índice HOMA. Determinación de actividad de la enzima NAD(P)H oxidasa en tejido aórtico para estimar el estado de estrés oxidativo. Cuantificación por citometría de flujo de los niveles de CPE en sangre periférica y en médula ósea. Inmunofluorescencia por microscopia confocal en cortes de lecho vascular mesentérico y médula ósea de los marcadores CD34, VEGFR-2 y CD133. Recuento de colonias de CPE en cultivo celular de médula ósea en medio RPMI suplementado con stem cell factor, vascular endothelial growth factor  y Flt-3. Los datos se presentan como media ± desviación estándar y fueron analizados con prueba de Kruskal-Wallis y post-test de Dunn. Los símbolos indican: * p<0,01 vs WKY; # vs SHR  Resultados: se confirmó el modelo experimental de síndrome metabólico en base a las variables metabólicas analizadas. Se observó una disminución en los niveles de CPE tanto circulantes en sangre periférica como en médula ósea, la que se hace más importante en los grupos de animales tratados con fructosa. En estos también hay menor número de colonias de CPE desarrolladas en cultivo celular de médula ósea (número de colonias por campo) y presentan un aumento en los niveles de estrés oxidativo, estimado por la actividad de NAD(P)H oxidasa (URL). Los ensayos de inmunofluorescencia permitieron observar la colocalización de los marcadores CD34/VEGFR-2/CD133, y también la disminución de las CPE presentes en pared vascular de mesenterio. Grupo WKY (n=8) FFR  (n=8) SHR (n=8) FFHR (n=8) CPE sangre (%) 0,30±0,06 0,18±0,01*# 0,25±0,09 0,06±0,02*# CPE MO (%) 0,15±0,02 0,008±0,005*# 0,11±0,005 0,05±0,005*# Rec. colonias 3,4±0,82 3,3±0,98 2,5±0,94 1,25±0,91* NADPH oxid. 38,3 ±0.16 50.14±0.95* 66,26±0.94* 160,65±0.71*# CPE pared 9,0±0,83 7,2±0,92 7,3±0,74 2,6±0,91* Conclusiones: Estos resultados sugieren la existencia de alteración en la reparación vascular mediada por CPE, como consecuencia de la DE presente en este modelo experimental de SM, evidente ya a nivel de los estadios más inmaduros de los progenitores medulares. Las CPE presentarían un acortamiento en su vida media, atribuible al estrés oxidativo del microambiente  al que se encuentran expuestas.