EFECTOS ANTITUMORALES DE UN INHIBIDOR DE LA SÍNTESIS DE ÁCIDO HIALURÓNICO EN UN MODELO MURINO DE HEPATOCARCINOMA ORTOTÓPICO

PICCIONI F; MALVICINI M; RIZZO M; KIPPES N; RODRIGUEZ A; AMANTE M; SILVA M; ALANIZ L; MAZZOLINI G

Congreso; XVI Congreso Argentino de Hepatología; 2011

Introducción: La cirrosis se caracteriza por una acumulación excesiva de componentes de la matrizextracelular, entre los que se encuentra el ácido hialurónico (HA). Dicho proceso puede ser consideradouna enfermedad pre-neoplásica que favorece la aparición del hepatocarcinoma (HCC).En la mayoría de los tumores la biosíntesis alterada de HA se asocia con mecanismos que favorecenla progresión tumoral, sin embargo su papel en el HCC aún no está claro. 4-methylumbelliferona(4MU), un agente oral biodisponible, es un inhibidor específico de la síntesis de HA conpropiedades antitumorales en ciertos tipos de cáncer, como próstata y melanoma.El objetivo del presente trabajo fue analizar si la inhibición de la síntesis de HA por 4MUdurante el desarrollo de la fibrosis hepática afecta la tumorogénesis en un modelo de HCCortotópico establecido en ratones.Materiales y métodos: Utilizamos un modelo murino de HCC ortotópico, inoculando1,25x105 células Hepa129 por inyección subcapsular en hígados con fibrosis avanzada inducidapor tioacetamida (200 mg/kg, 3 veces/semana durante 28 días). Posteriormente, los animalesfueron tratados con 4MU por vía i.p. a dosis de 20mg/kg/día durante 14 días. Evaluamoslos efectos biológicos de 4MU en células Hepa129 y en una línea de células estrelladas hepáticas(HSCs) in vitro, analizando proliferación por incorporación de 3H, apoptosis por naranjade acridina y bromuro de etidio y citotoxicidad por detección de la actividad LDH. Se analizóel crecimiento tumoral mediante medición con calibre del nódulo principal y sus nódulos satélites,el nivel de HA en suero mediante ELISA. Se estableció el estadio de fibrosis según el índiceMetavir (F0: sin fibrosis, F4: cirrosis); además, se estudió el grado de activación de las HSCmediante la cuantificación del área positiva para actina de músculo liso (a-SMA).Resultados: El tratamiento del HCC con 4MU inhibió significativamente la proliferación decélulas tumorales (p<0.01, ANOVA) e indujo su apoptosis (p<0.05, ANOVA); a su vez, el cultivoprimario de hepatocitos no se vio afectado lo que refleja la baja toxicidad de 4MU. La terapiacon 4MU redujo los niveles hepáticos y sistémicos de HA (p<0.05, Mann Whitney). Elanálisis histológico de los tumores provenientes de animales tratados con 4MU mostraronextensas áreas de necrosis, infiltrado inflamatorio y reducción de 2-3 veces del número denódulos satélites (p < 0.05, Mann Whitney). Además, no se observaron signos de toxicidad ylos niveles de ALT no se modificaron tras la terapia con 4MU. Los animales tratados con 4MUmostraron una reducción en el grado de fibrosis en comparación a los controles (F1-2 vs F2-3,respectivamente). 4MU indujo apoptosis de HSCs in vitro (p<0.05, ANOVA) y redujo la cantidadde HSCs activadas in vivo (p<0.001, ANOVA). Conclusiones: Nuestros resultados sugierenque 4MU tiene efectos terapéuticos beneficiosos en un modelo de HCC asociado a fibrosislo cual amerita profundizar en su estudio.