ESTUDIO DE LA CAPACIDAD MIGRATORIA DE LAS CÉLULAS MESENQUIMALES ESTROMALES AL HEPATOCARCINOMA

BAYO FINA J; BOLONTRADE M; SGANGA L; MALVICINI M; ALANIZ L; AQUINO JB; FIORE E; RIZZO M; RODRIGUEZ A; LORENTI A; ADRIANI O; PODHAJCER O; GARCIA M; MAZOLLINI G

Congreso; XVI Congreso Argentino de Hepatología; 2011

El hepatocarcinoma (HCC) es el 6º tumor sólido más frecuente y la tercera causa de muerte asociadaa cáncer en el mundo. El HCC se desarrolla en la mayoría de los casos en pacientes con cirrosishepática. El establecimiento y diseminación de un tumor depende no sólo del comportamiento de lascélulas tumorales sino también del aporte del microambiente tumoral, donde además de la presenciade distintos tipos celulares como fibroblastos y macrófagos, intervienen factores pro-inflamatorios yquimiocinas. Estas quimiocinas son esenciales en el reclutamiento de las células mesenquimalesestromales (MSC) capaces de migrar hacia sitios de injuria o remodelamiento tisular. El objetivo deeste trabajo es estudiar la capacidad migratoria in vitro e in vivo de las MSC humanas provenientesde medula ósea (hMSC) de donantes sanos hacia el HCC. Ensayos de migración in vitro en cámarasde Boyden demostraron que las hMSC presentaron una elevada capacidad de migrar hacia medioscondicionados (MC) derivados de líneas celulares de HCC humano (Hep3B, HuH7 y PLC/PRF/5),de cultivo primario de muestra de paciente (HC-PT-5) y de células estrelladas hepáticas humanas(línea LX-2), pero no presentaron migración hacia MC provenientes de fibroblastos (WI-38), célulasendoteliales (HMEC-1) o tejido no tumoral de muestra de paciente (AT-PT-5) (p<0.01; Kruskal-Wallis). Además, los MC de las células cultivadas en monocapa indujeron mayor migración de lashMSC que los MC obtenidos de cultivos en esferoides o de tumores ex vivo (p<0.05, Kruskal-Wallis).Los MC de las líneas de HCC y LX-2 incrementaron la adhesión de las hMSC a fibronectina, colágenoy células endoteliales, además de inducir la invasión a través de estos sustratos y aumentar la actividadde la metaloproteinasa 2. Para evaluar la migración in vivo, se inocularon de manera subcutáneao intrahepática con o sin cirrosis subyacente ratones nude BALB/c con HuH7. Con el tumorestablecido se administraron las hMSC marcadas con los colorantes CMDil y DiR por vía intravenosay se monitorizó la biodistribución en un bioluminómetro y la presencia de hMSC en los tejidospor microscopía de fluorescencia luego de sacrificar a los ratones al día 7. Las hMSC se localizaronen pulmón a 1 h y a las 24 h fueron observadas también en hígado y bazo. A los 7 días se localizaronen los órganos descriptos y en los tumores en el modelo tumoral subcutáneo. Sin embargo los MCderivados de hígado, bazo o pulmón de ratones portadores de tumor no indujeron la migración invitro de las hMSC. Sorprendentemente, en el modelo ortotópico, las hMSC fueron localizadas preferentementeen el hígado a los 7 días. Nuestros resultados indican que factores producidos por elHCC y las células estrelladas hepáticas inducen la migración in vitro e in vivo de las hMSC. El estudiode estos mecanismos permitirá mejorar el reclutamiento de las hMSC hacia el tumor a fin de utilizarlascomo vehículos celulares de agentes terapéuticos en el HCC.