APLICACIÓN DE CÉLULAS ESTROMALES MULTIPOTENTES DE MÉDULA ÓSEA EN UN MODELO MURINO DE FIBROSIS HEPÁTICA

AQUINO JB; FIORE E; MALVICINI M; MAGGINI J; BAYO FINA J; PICCIONI F; GARCIA M; BOLONTRADE M; LOPEZ MV; ALANIZ L; GEFFNER J; PODHAJCER O; MAZZOLINI G

Congreso; XVI Congreso Argentino de Hepatología; 2011

INTRODUCCIÓN: La cirrosis es la primera causa de trasplante hepático en la Argentina y, aexcepción de este procedimiento, no existe en la actualidad un tratamiento eficaz para esta enfermedad.Las células estromales multipotentes (MSCs) tienen un especial interés por su potencialutilización en estrategias de terapia celular para el tratamiento de la fibrosis/cirrosis hepática. Estascélulas tienen la capacidad de migrar hacia los sitios de lesión y podrían ejercer efectos anti-fibrogénicos.OBJETIVOS: Evaluar la capacidad migratoria, la biodistribución in vivo y el efecto terapéuticode las MSCs en un modelo de cirrosis experimental en ratón. MATERIALES Y MÉTODOS: Paragenerar el modelo de fibrosis hepática avanzada, se aplicó tioacetamida (TAA) en ratones C57Bl/6(por vía intraperitoneal, 3 veces/semana, en dosis de 200mg/kg, durante 12 semanas). Las MSCsse obtuvieron de médula ósea de ratones singénicos y de ratones transgénicos para la proteínaverde GFP y fueron caracterizadas por citometría de flujo y tests de diferenciación hacia osteoblastos,adipoblastos y condroblastos. Antes de su administración intravenosa, las MSCs fueronmarcadas con los colorantes CM-DiI, DiR, Hoechst o transducidas con un retrovirus codificantepara el gen reportero venus para su visualización in vivo. Tras 7 o 14 días, los animales fueron sacrificadospara su estudio. Se analizó la biodistribución in vivo de las células inyectadas de manerano invasiva, mediante bioluminómetro, y se determinó el grado de fibrosis hepática desarrolladomediante tinción con rojo sirio.RESULTADOS: Las cultivos obtenidos presentaron las propiedades características de MSCs.Mediante la utilización de bioluminómetro, a los 3 días post-transplante pudo detectarse unamayor presencia de MSCs en el hígado en comparación con otros órganos/tejidos a las distintassobrevidas analizadas (2 horas, y 1 y 7 días). A los 7 días, las MSCs pudieron ser visualizadas pormicrocopia de fluorescencia. Sin embargo, a los 14 días no se encontró un número significativode MSCs (marcadas previamente con CM-DiI, Hoechst, o transducidas con el retrovirus reportero)en el tejido hepático. Además, se observó un menor grado de fibrosis en los animales que recibieronMSCs en comparación con los tratados con vehículo (p<0,05; t-student; a 14 días posttrasplante).CONCLUSIONES: Las evidencias obtenidas sugieren que las MSCs podrían ejercer un efectoanti-fibrogénico en el modelo de fibrosis hepática estudiado. Asimismo, la presencia significativade MSCs en el parénquima hepático permite considerar la posibilidad de utilizar estas célulascomo vehículo de genes terapéuticos en el hígado.