La inducción de la apoptosis tumoral por fragmentos de Acido Hialurónico es independiente de la actividad del factor de transcripción NFkB

ALANIZ LAURA; GARCÍA MARIANA; BLANCO GUILLERMO; DIEZ FEDERICO; ALVAREZ ELIDA; HAJOS SILVIA E

Mar del Plata, Bs. As. Argentina

Congreso; XLVIII Reunión Anual de la SAIC y LI Reunión Anual de la SAI; 2003

SAIC/SAI

Resumen Distintos componentes de la matriz extracelular (MEC) son capaces de modular el comportamiento tumoral. Entre estos se encuentra el AH que al interaccionar con la molécula de adhesión CD44, puede influir sobre la migracón, sobrevida, proliferación tumoral, efectos que estrían en relación con su PM. NFkB capaz de inducir la expresión de múltiples genes, como los anti-apoptóticos. En algunas células tumorales se halla activado constitutivamente por distintos mecanismos. AH altamente expresado en la MEC que rodean a algunos tipos de tumores podría mantener la actividad constante de NFkB y afectar la sobrevida tumoral. Estudios previos en las líneas celulares de un linfoma T murino, LBLa y LBLc, indicaron que AH fue capaz de regular la migración celular, activación de metaloproteinasas, por lo cual se propuso estudiar su efecto sobre la actividad de NFkB y apoptosis celular. Se realizaron ensayos de EMSA para evaluar la actividad de NFkB, y efectos por AH, su inhibidor especifico, BAY 10-7082 y Wartmannina, inhibidor de PI3K, proteína capaz de inducir señales anti-apoptóticas, tal como la activación de NFkB. Se halló actividad basal en extractos nucleares de LBLa y LBLc, siendo mayor en la primera. Estas señales pudieron ser inhibida por BAY 10-7082, pero no por Wartmannina. El tratamiento con AH de alto (APM) aumentó la señal basal en ambas líneas, efecto mediado por CD44, ya que pudo ser bloqueado por el AcMo IM7; la especie de AH de bajo PM (BPM) no modificó la actividad. El tratamiento conjunto de AH-APM con hialuronidasa (Hasa) disminuyó la actividad al basal, pero no produjo inhibición completa. Dado estos resultados evaluamos sí el efecto de AH e inhibidores sobre NFkB, estaban en relación con sus efectos anti-apototicos. Por microscopia de fluorescencia y fragmentación del ADN, se analizó la apoptosis en iguales condiciones en que se realizaron los ensayos de EMSA. AH-APM o BPM no afectaron significativamente la sobrevida, por el contrario el tratamiento con Hasa adicionada a ambos tipos de AH indujo apoptosis (entre 23±2 y 19±3 %). Similarmente lo hicieron Bay 10-7082 y Wartmannina. La mayor actividad basal de NFkB en LBLa respecto de LBLc podría estar en relación  con su mayor agresividad. La inhibición total de NFkB por Bay 11-7082 estaría en relación con la