Enzimas de Acremonium strictum para la obtención de compuestos polifenólicos con potencial actividad farmacológica

ALINA GONZALEZ; MICAELA BAGLIONI; JAVIER BRECCIA; ELIAS PROST; GISELA WEIZ; IARA MANSILLA; MARÍA INÉS MOLEJON

San Luis (San Luis)

Simposio; III Simposio Latinoamericano de Biocatálisis y Biotransformaciones; 2018

Sociedad Argentina de Biocatálisis y Biotransformaciones

Las diglicosidasas son enzimas que catalizan la hidrólisis del enlace heterosídico de flavonoides y liberan el disacárido y su correspondiente aglicona en una sola reacción [1]. En el caso de rutina su hidrólisis da como resultado el disacárido rutinosa y el polifenol quercetina.Se cultivaron 28 cepas de los géneros Acremonium y Sarocladium en presencia de los flavonoides hesperidina, diosmina y rutina [2]. Con los dos primeros no se detectaron halos de hidrólisis, mientras que 21 cepas fueron capaces de hidrolizar rutina. El halo de hidrólisis del flavonoide no indica si la desglicosilación se produce en una o dos reacciones (fig 1). En un análisis zimográfico con el sustrato 4-metilumbeliferil-rutinósido siete cepas presentaron actividad diglicosidasa. Entre ellas, Sarocladium strictum DMic 093557 presentó la mayor tasa de clarificación de rutina (2.1 mm/día) en medio sólido. En cultivo sumergido, con rutina como fuente de carbono la máxima producción de actividad desglicosilante (22.4 ± 4.1 U/L) se detectó al octavo día. Se confirmó la actividad diglicosidasa mediante la identificación de los productos de hidrólisis de rutina (rutinosa y quercetina) y la enzima purificada a homogeneidad presentó un pH óptimo de 6 y una temperatura de 60 °C.Si bien en las 28 cepas los géneros Acremonium y Sarocladium no se encontraron enzimas específicas para los 7-O-rutinósidos (hesperidina y diosmina), un 25% de las cepas que hidrolizaron rutina fueron potenciales productoras de diglicosidasas para 3-O-rutinósidos. Esto indica que la posición donde está unido el residuo glicosídico juega un papel importante en la catálisis. La cepa seleccionada (S. strictum DMIc 093557) por su tasa de hidrólisis de rutina en medio sólido, produce una diglicosidasa con potencial aplicación para la producción de quercetina en condiciones de baja temperatura y pH cercano a la neutralidad.