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Fosforilacion de 11S globulinas de semillas de girasol Yoseli Quiroga, Mariana Regente, Luciana Pagnussat, Laura de la Canal. Inst. de Investigaciones Biologicas-CONICET-UNMdP-CC1245-7600-Mar del Plata-E-mail: iyquiroga@mdp.edu.ar La fosforilacion de proteinas es un evento regulatorio rapido y reversible que constituye una de las modificaciones postraduccionales mas frecuentes involucrada en diferentes procesos biologicos. Aunque se sabe que la germinacion se desencadena como consecuencia de la combinacion de multiples eventos metabolicos y celulares, la contribucion de la fosforilacion de proteinas en este proceso aun no ha sido estudiada. El objetivo del trabajo fue analizar el patron de fosfoproteinas de semillas de girasol y su evolucion durante la germinacion. El analisis proteomico de extractos totales de semilla permitio la identificacion de diferentes variantes de 11S globulina que mostraron el mismo peso molecular (25 kDa aprox.) pero distinto punto isoelectrico dentro del rango basico. Las 11S globulinas o helianthininas constituyen la reserva proteica mayoritaria de la semilla de girasol. Se trata de proteinas hexamericas con subunidades conformadas por una cadena polipeptidica acidica alfa (30-40 kDa) y otra basica beta (23-27 kDa), unidas ambas por puentes disulfuro. La tincion positiva de las variantes identificadas con el colorante Q-Diamond, especifico para fosfoproteinas, permitio sugerir que las diferencias halladas corresponderian a distintos estados de fosforilacion de la cadena beta. El analisis de los perfiles electroforeticos de fracciones retenidas en columnas de afinidad para fosfopeptidos y posterior inmunodeteccion con anticuerpos anti-11S globulina permitio reforzar el concepto de la presencia de residuos fosforilados en la proteina. Ademas, las bandas proteicas inmunodetectadas con dichos anticuerpos fueron tambien reconocidas por anticuerpos monoclonales anti-fosfoserina, mostrando nuevamente la presencia de fosforilacion entre las helianthininas. Por otra parte, mediante las diferentes aproximaciones experimentales empleadas se verificaron mayores niveles de fosforilacion en semillas en germinacion respecto a las semillas secas. Los resultados encontrados permiten sugerir que la fosforilacion de 11S globulinas podria estar vinculada con la utilizacion de esta proteina de reserva durante el proceso de germinacion en semillas de girasol.