REMOCIÓN IN VITRO E IN VIVO DE LA PROTEÍNA DECAPACITANTE SPINK3 POR INTERACCIÓN CON EL TRACTO FEMENINO EN MUS MUSCULUS

GRECO, MICAELA; CESARI, ANDREINA; NICOLLI, ANABELLA; PEREZ MARTINEZ, SILVINA; GUAGNINI, MARCELO

Mar del Plata

Congreso; Biólogos en Red; 2019

En los mamíferos, la capacitación de los espermatozoides está regulada por factores decapacitantes secretados por las glándulas accesorias masculinas. Después del apareamiento, los espermatozoides interactúan con el útero y el oviducto del tracto femenino, lo cual, es un paso fundamental para la selección, supervivencia y capacitación de los mismos. SPINK3 es una proteína decapacitante secretada por la vesícula seminal en ratón. El objetivo de este trabajo fue evaluar el sitio y la cinética de liberación de SPINK3 de la superficie espermática dentro del tracto femenino en ratones Mus musculus. Se realizaron dos enfoques: a- Los espermatozoides epididimarios fueron preincubados con SPINK3 recombinante e incubados con fluido uterino de hembras en estro o metaestro y se evaluó la localización de SPINK3 por inmunocitoquímica. b- Hembras en estro fueron sacrificadas 0, 1.5 y 3hs después del coito y se diseccionó la región útero-oviducto. La presencia de SPINK3 fue evaluada por inmunocitoquímica e inmunohistoquímica. Después de 15-30 minutos de incubación con fluido uterino en estro, la proporción de células con SPINK3 en la región apical y el flagelo se redujo significativamente. Para la prueba in vivo, los espermatozoides obtenidos del útero en el momento 0 mostraron señal de SPINK3 en la cabeza y el flagelo, mientras que 1.5 horas después del coito solo se observó la señal del flagelo en el útero y el oviducto. Después de 3 horas, se observó que los espermatozoides interactuaban con el epitelio oviductal sin señal de SPINK3. Nuestros resultados sugieren que el desprendimiento de SPINK3 es un proceso de dos pasos en el que la liberación de la cabeza y del flajelo está mediada por diferentes estímulos femeninos. El tiempo y la sección del tracto femenino donde se perdió SPINK3 se encuentran en línea con evidencia acerca de la regulación de CatSper.