IIB   20738
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES BIOLOGICAS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
OPTIMIZACIÓN DE LA ACTIVIDAD FIBRINOGENOLITICA DE UNA SUBTILISINA DE PAPA POR MEDIO DEL ANÁLISIS DE SUPERFICIE DE RESPUESTA
Autor/es:
GUEVARA, MARIA GABRIELA; PEPE, ALFONSO; TITO, FLORENCIA ROCIO
Lugar:
CABA
Reunión:
Congreso; XIII Congreso Argentino de Hemostasia y Trombosis y IV Curso Educacional de la ISTH; 2018
Institución organizadora:
Grupo CAHT
Resumen:
Las enfermedades cardiovasculares son actualmente la principal causa de muerte a escala global. Por este motivo, la caracterización de extractos y enzimas purificadas de origen vegetal con actividades fibrinogenolíticas y antitrombóticas ha sido extensamente reportada en bibliografía.Previamente se ha realizado la caracterización in vitro de StSBTc-3, una serín proteasa de Solanum tuberosum (papa) del tipo subtilisina. Se encontró que esta enzima posee actividad fibrinogenolítica. El objetivo del presente trabajo fue optimizar la actividad fibrinogenolítica de la serín proteasa StSBTc-3 utilizando la metodología de análisis de superficie de respuesta. Se estudió el efecto de la concentración de enzima, el pH y la temperatura sobre la actividad fibrinogenolítica. El diseño experimental consistió en 12 experimentos correspondientes a un diseño del tipo Box-Behnken de tres factores, sumados a otros 3 correspondientes al centro del dominio experimental.Se obtuvo un modelo que predice la respuesta (actividad fibrinogenolítica) de manera precisa. La relación entre la concentración enzimática y la actividad fue lineal, mientras que la principal contribución del pH y la temperatura a la respuesta fue cuadrática. A partir del modelo de superficie de respuesta generado se obtuvo el pH (8) y la temperatura (43 ºC) óptimos. Debido a que la dependencia con la concentración enzimática fue lineal, concentraciones mayores de enzima producen un aumento en la actividad fibrinogenolítica.Para validar el modelo se midió experimentalmente la actividad en las condiciones óptimas calculadas. La respuesta obtenida no fue significativamente diferente respecto de las predichas por el modelo de superficie de respuesta. El modelo también permitió predecir la actividad bajo condiciones fisiológicas resultando en valores cercanos al óptimo (85%). Este resultado confirma que StSBTc-3 es un buen candidato para ser utilizado en terapias fibrinogenolíticas.