MENEW, UNA PROTEÍNA CON DOMINIOS DC1, ES ESENCIAL PARA LA MICROGRAMETOGÉNESIS

ARIAS LA; PAGNUSSAT GC; D IPPOLITO, S.; FIOL DF; CASALONGUE, CA

Rosario

Simposio; Simposio de Genómica Funcional de Plantas; 2017

Universidad Nacional de Rosario

En este trabajo se identificóuna proteína con dominios DC1 esencial para la microgametogénesis a la que se llamó MENEW. Los dominios DC1, que se encuentran exclusivamente en plantas, son estructuralmente similares a los dominios C1 de unión a diacilglicerol, aunquesu función es aún desconocida.El estudio de dos líneasalélicas independientes de Arabidopsis con inserciones en MENEWpermitió determinar que esta proteína es requerida para el desarrollo del gametofito masculino o microgametofito. Un análisis detallado de las distintas etapas de desarrollo del microgametofito utilizando tinciones con DAPI mostró que los granos de polen mutantes no completan la mitosis II;su desarrollo se detiene en el estadio bicelular y no son capaces de germinar. Mediante la construcción y análisis delíneas reporteras pMENEW:GUS se caracterizó la expresión de MENEW, encontrándose una alta actividad del promotor en el tejido vascularde todos los órganos, los tejidos en expansión,la inflorescencia y engranos de polen. Mediante la expresión transiente en hojas de Nicotiana benthamiana de pMENEW:MENEW-GFPse determinó que la proteína en estudiose localiza en vesículas del sistema de endomembranas positivas para el marcador de endosomas tardíosRFP-Rha1. Mediante ensayos de doble híbrido en levadura y experimentos de complementación bimolecular de la fluorescencia (BiFC), se demostró que MENEW interactúa con los factores de transcripción VOZ1 y VOZ2, involucrados en el desarrollo de polen y de la floración, entre otros procesos.Estos resultados sugieren que MENEW podría funcionar mediando la translocación de los factores de transcripción VOZ1 y VOZ2 durante el desarrollo del microgametofito.