IIB 20738
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES BIOLOGICAS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Función del shuttle electrónico ADXR-ADX-P450 en el desarrollo del gametofito femenino y la síntesis de hormonas esteroides en Arabidopsis.
Autor/es:
SETZES NICOLÁS; DIEGO F. FIOL; ANDRES M. BELLIDO; GABRIELA C. PAGNUSSAT; DISTEFANO AYELEN.MARIANA; EDUARDO J. ZABALETA
Lugar:
Rosario
Reunión:
Simposio; Simposio de Genómica Funcional de Plantas; 2017
Institución organizadora:
SGFP
Resumen:
En nuestro laboratorio hemos encontrado que las ferredoxinas mitocondriales adrenodoxina1 y 2 (ADX1 y ADX2) y una adrenodoxina reductasa (ADXR), son esenciales durante la gametogénesis femenina en A. thaliana. En animales, ADXR junto a una ADX y a un citocromo P450 (P450), constituyen un sistema de transporte de electrones mitocondrial requerido para la síntesis de hormonas esteroideas. Nuestra hipótesis es que una vía similar podría ser funcional en plantas, produciendo precursores esteroideos que serían fundamentales para el desarrollo normal del saco embrionario. Con el objeto de detectar posibles interactores para ADX1, realizamos un ensayo de doble híbrido en levadura, el cual mostró que ADX1 interacciona con CYP711A1, un citocromo P450. Para analizar ubicación subcelular de CYP711A1, realizamos fusiones traduccionales con GFP que fueron expresadas en forma transiente en N. Benthamiana y se estudió su co-localizacion con un marcador mitocondrial. Por otra parte, se construyeron fusiones traduccionales con GFP para otros 10 citocromos P450 cuya localización subcelular fue predicha como mitocondrial mediante un estudio bioinformático. Utilizando esta estrategia se observó que CYP90A1, CYP75B1 y CYP71B9 están presentes en mitocondria. Por otra parte, se comprobó que los tres citocromos estudiados interaccionan con ADX1 in vivo mediante ensayos de BIFC. Aunque las mutantes simples para CYP711A1, CYP90A1, CYP75B1 y CYP71B9 no presentaron defectos reproductivos, las mutantes doble hemicigotas cyp711A1/CYP711A1,cyp90A1/CYP90A1 presentan un fenotipo gametofitico similar al observado en las mutantes adxr, lo que sugiere que ADXR-ADX-P450 (CYP711A1-CYP90A1) podrían formar parte de la misma vía.
