La producción de ácido fosfatídico vía fosfolipasa D es requerida para la formación de raíces adventicias inducida por auxinas y óxido nítrico

LANTERI MARÍA LUCIANA, LAXALT ANA MARÍA, LAMATTINA LORENZO

Rosario, Santa Fe, Argentina

Jornada; Jornadas de Lípidos 2008; 2008

El óxido nítrico (NO) es un segundo mensajero en la vía de transducción de señales disparada por auxinas que conduce al crecimiento y desarrollo de las raíces. Las vías que son inducidas por auxinas y NO para promover la formación de raíces adventicias en explantos de pepino (Cucumis sativus) incluyen la participación de cGMP, Ca2+ y quinasas de proteína. El objetivo de este trabajo fue estudiar vías de señalización por fosfolípidos durante la formación de raíces adventicias en pepino. Los explantos fueron marcados in vivo con [32Pi] durante 16 h y sometidos a tratamientos con las auxinas IAA o NAA, o con el dador de NO SNAP. Los fosfolípidos fueron analizados por cromatografía en capa delgada y posterior autoradiografía. Los fosfolípidos señales ácido fosfatídico (PA), fosfatidilinositol fosfato (PIP) y fosfatidilinositol bifosfato (PIP2) se acumularon rápida y transientemente (máximo a 5-10 min, disminución a 20-30 min) en respuesta a auxinas y NO. Con el objeto de determinar si la acumulación de fosfolípidos por auxinas requiere de NO, se llevaron a cabo experimentos usando el secuestrante específico de NO cPTIO. El cPTIO bloqueó el efecto inductor de las auxinas sobre la acumulación de fosfolípidos, sugiriendo una dependencia de NO endógeno. Además, se evaluó la fuente enzimática de producción de PA mediante marcación diferencial y medición de actividad fosfolipasa D (PLD) en presencia de 1-butanol. Se detectó una activación de PLD por auxinas y NO. Para correlacionar la acumulación de fosfolípidos con el proceso de formación de raíces adventicias, se realizaron ensayos evaluando el número de raíces por explanto. El incremento en el número de raíces inducido por auxinas y NO requirió de la actividad PLD. A su vez, la aplicación exógena de PA aumentó significativamente el número de raíces. Estos resultados sugieren que el PA derivado de la actividad PLD es un evento de señalización temprano en la formación de raíces adventicias inducida por auxinas y NO.