INFLUENCIA DEL PROCESAMIENTO DE ALIMENTO BALANCEADO DESTINADO A PRODUCCIÓN AVÍCOLA SOBRE LA MICOBIOTA E INCIDENCIA DE OCRATOXINA A

CARINA PEREYRA; GABRIELA PENA; LILIA CAVAGLIERI; VERÓNICA ALONSO; STELLA CHIACCHIERA; ANA DALCERO

Rio de Janeiro (Brasil)

Congreso; XIII Encuentro Internacional de Micotoxinas; 2008

03 - INFLUENCIA DEL PROCESAMIENTO DE ALIMENTO BALANCEADO DESTINADO A PRODUCCIÓN AVÍCOLA SOBRE LA MICOBIOTA E INCIDENCIA DE OCRATOXINA A. CARINA PEREYRA1,3; GABRIELA PENA1; LILIA CAVAGLIERI1,4; VERÓNICA ALONSO1, STELLA CHIACCHIERA2,4; ANA DALCERO1,4. 1Departamento de Microbiología e Inmunología. 2Departamento de Química. Universidad Nacional de Río Cuarto. Ruta 36 Km. 601. (5800) Río Cuarto. Córdoba. Argentina 3Fellowship of Fondo para la Investigación Científica y Tecnológica (FONCYT). 4Member of Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas (CIC-CONICET) cpereyra@exa.unrc.edu.ar Abstract. In Argentina feeds are an important component in modern animal agriculture, but little information on the influence of feed processing on the mycobiota and the incidence of ochratoxin A in poultry feed is available. The aim of this study was to determine the incidence of mycoflora into pelleted and non pelleted feed, and to evaluate the OTA feed incidence. Moreover, the ability to produce OTA by strains of Aspergillus spp. was investigated. A total of 50 samples of poultry feed were analyzed. Total fungal counts were determined in DRBC and xerophilic fungi in DG18. The ochratoxin A was quantified by HPLC. The fungal total count was lower than 1 x 104 CFU/g in both culture media. In 100% of the pelletized samples Aspergillus spp. and Eurotium spp. were isolated whereas Fusarium spp. were isolated from all non pelletized samples. Aspergillus flavus was the most prevalent. The 43% of A. niger strains were ochratoxicogenic. Detectable levels of OTA in both kind of feed were found. The presence of OTA in pig feed must be inspected and practices of processing and storage must be investigated to establish the toxicological risk in feed for poultry production. Palabras clave: ocratoxina A, alimentos balanceados, pollos Introducción. La elaboración comercial de alimentos balanceados constituye un componente de gran importancia en la industria animal, ya que representa entre un 75-80% de los costos totales de producción. La presencia de OTA en alimentos destinados a pollos afectan  la industria avícola provocando disminución de peso e inmunosupresión, aumentando la susceptibilidad a las intoxicaciones subclínicas (Gentles et al. 1999). Los objetivos de este trabajo fueron 1) Analizar la micoflora, y 2) evaluar la incidencia de OTA y la capacidad de hongos ocratoxicogénicos de alimento balanceado pelletizado y no pelletizado destinados a la producción avícola. Materiales y Métodos. Se obtuvieron un total de 50 muestras provenientes de un establecimiento avícola de la región. Las cepas del género Aspergillus fueron identificadas a nivel de especie (Klich 2002). La capacidad de cepas ocratoxicogénicas fue determinada por la metodología descripta por Bragulat y col. (2001). La incidencia de OTA se determinó por cromatografía de alta precisión (HPLC). Resultados y Discusión. El recuento fúngico en DRBC varió entre 1,2 x 102 a 1,1 x 104 UFC/g y de 6 x 102 a 8,9 x 103 UFC/g, para alimento pelletizado y no pelletizado, respectivamente.  En DG18 se obtuvieron valores entre 6 x 102 a 3,2 x 103 para limento pelletizado y de 4,5 x 102 a 1,8 x 104 UFC/g para alimento no pelletizado (Tabla 1). En la figura 1 se observa la frecuencia de aislamiento (%) de diferentes géneros fúngicos. Se identificaron 8 géneros filamentosos y levaduras. En el 100% de las muestras de alimento pelletizado se aislaron Aspergillus spp. y Eurotium spp., seguido por Penicillium spp. y levaduras (65%), mientras que en el 50% de las muestras se encontraron especies de Fusarium y con menor frecuencia se aislaron Cladosporium spp., Talaromyces spp., mucorales y Alternaria spp. En la figura 2 se observa la densidad relativa (%) de especies de Aspergillus.. Aspergillus flavus (46%) y A. niger (29%) fueron las especies prevalentes en muestras de alimento pelletizado, seguido por A. oryzae (16%), A. candidus (4,3%) y A. fumigatus (4,2%), mientras que en muestras de alimento no pelletizado la especie más frecuente fue A. flavus (60%) seguida por A. oryzae (20%) y A. candidus (20%). El 43% de las cepas de A. niger aisladas de alimento pelletizado fueron capaces de producir OTA en niveles que variaron entre 2,9 – 8,75 ng/g (Tabla 2). En el 50% de las muestras de alimento pelletizado se detectaron en promedio niveles de OTA de 0,74 ± 0,56 ng/g, mientras que en el 40% de las muestras de alimento no pelletizado se encontraron niveles de OTA por debajo del límite de cuantificación (LOD) establecido en 0.25 ng/g (Tabla 3). Conclusión La mayoría de los estudios indican que no existe correlación entre la presencia de una toxina y la producción de hongos en el mismo sustrato, sin embargo la presencia de hongos toxicogénicos es un indicativo de su potencialidad para producir micotoxinas. Es importante promover en la industria de alimentos animales la realización de estudios de micotoxinas y los métodos de prevención de las mismas en forma simultánea. Agradecimientos: Este trabajo fue subsidiado por SECYT- UNRC, CONICET y FONCYT-PICTO. Referencias                                                                                                           Klich, M.A. (2002). Identification of common Aspergillus species (CBS, Utrecht, Netherlands) Oliveira G.R., Ribeiro J.M.M., Fraga M.E., Cavaglieri L.R., Direito G.M., Keller K.M., Dalcero A.M., Rosa C.A.R. (2006). Mycobiota in poultry feeds and natural occurrence of aflatoxins, fumonisins and zearalenone in the Rio de Janeiro State, Brazil. Mycopahologia 162, 355-362. Rosa C.A.R., Ribeiro J.M.M., Fraga M.E., Gatti M., Cavaglieri L.R., Magnoli C.E., Dalcero A.M., Lopes C.W.G. (2006) Mycobiota of poultry feeds a nd ochratoxin-producing ability of isolated Aspergillus and Penicillium species. Vet Microbiol 13, 89-96. AP: alimento peletizado; ANP: alimento no peletizado; DS: desvío standard. Figura 1. Frecuencia de aislamiento (%) de géneros fúngicos de alimento balanceado A) peletizado y B) no peletizado, destinados a la producción avícola. Figura 2. Densidad relativa (%) de especies de Aspergillus aisladas de alimento balanceado peletizado y no peletizado destinados a la producción avícola. Tabla 1: Recuento fúngico total y de Aspergillus spp. en DRBC y DG18 de alimento balanceado peletizado y no peletizado destinados a la producción avícola. Medio de cultivo Muestreo Recuento fúngico total (UFC/g) Recuento de Aspergillus spp. (UFC/g) Rango Media ± DS Rango Media ± DS DRBC AP 1.2 x 102-1.1 x 104 1.7 x 103 ± 2.9 x 103 < 1x 102  - 5 x 102 2.8 x 102 ± 1.6 x 102 ANP 6 x 102 - 8.9 x 103 2.1 x 103 ± 2.1 x 103 1 x 102 - 4 x 102 2.6 x 102 ± 1.5 x 102 DG18 AP 6 x 102- 3.2 x 103 1.6 x 103 ± 8.6 x 102 < 1x 102 - 5 x 102 1.6 x 102 ± 1.6 x 102 ANP 4.5 x 102- 1.8 x 104 2.3 x 103 ± 4.7 x 103 < 1x 102 - 2 x 102 1.1 x 102 ± 3.5 x 102 AP: alimento pelletizado, ANP: alimento no pelletizado, DS: Desvío standard; Límite de detección: 1x 102 UFC g-1; Nivel máximo recomendado: 1 x 104 UFC/g (GMP, 2005) Tabla 2. Producción de ocratoxina A por cepas de A. niger aisladas de alimento pelletizado y no pelletizado. Muestra Cepas productoras de OTA (%) Producción de OTA (ng/g) Rango Media±DS AP 43 % 2.9 - 8.75 4.95 ± 3.3 ANP  0 % - - . AP: alimento peletizado, ANP: alimento no peletizado, DS: desvío Standard, Límite detectable: 0,1 ng/g; Límite cuantificable: 0,25 ng/g Tabla 3. Niveles de ocratoxina A encontrados en alimento balanceado peletizado y no peletizado destinado a la producción avícola. Muestra Muestras con niveles detectables de OTA(%) Muestras cuantificables para OTA (%) Rango (ng/g) Valor medio ± DS (ng/g) AP 10 40 0.26 – 1.34 0.74 ± 0.56 ANP 40 0 -